Podrobno

Razvoj postopkov enkapsulacije bakteriofagov z liofilizacijo
ID Rus, Ana (Avtor), ID Podgornik, Aleš (Mentor) Več o mentorju... Povezava se odpre v novem oknu

.pdfPDF - Predstavitvena datoteka, prenos (1,85 MB)
MD5: 0EABB837F6164B9503D3BB629F1AAE3D

Izvleček
Populacija bakterij odpornih na antibiotike se povečuje, zato so nujno potrebni drugačni pristopi k zdravljenju. Uničenje patogena z bakteriofagi predstavlja velik potencial, ki lahko zniža delež obolelih za bakterijskimi okužbami kot je salmonela. Trenutno so v uporabi tekoče formulacije, ki so manj stabilne kot liofilizirane in enkapsulirane. Namen magistrske naloge je bil pripraviti stabilnejšo obliko bakteriofagov s postopki liofilizacije in enkapsulacije. Pri delu smo uporabili bakteriofag za bakterijo Salmonella enterica. Bakteriofagom smo v manjših volumnih (20 in 100 mL) določili optimalne pogoje za gojenje (OD600 in multicipliteto okužbe) in jih namnožili v večjem volumnu (500 mL). Namnoženim bakteriofagom smo v postopku filtracije s tangencialnim tokom (TFF) zamenjali gojišče s pufrom TRIS-NaCl. Z dodatkom pomožnih snovi smo pripravili formulacije tako, da smo bakteriofagom smo dodali trehalozo, laktozo, L-levcin in MgSO4. Liofilizatu smo z analitskimi metodami (metoda Karl-Fischer in meritve izgub pri sušenju) določili delež vlage, temperaturo steklastega prehoda (Tg) pa smo določili z metodo diferenčne dinamične kalorimetrije. Ugotovili smo, da je delež vlage v vzorcu povezan z vrednostjo Tg. Vzorec z dodano laktozo je vseboval najnižji delež vlage in je imel najvišjo vrednost Tg. Testirali smo stabilnost liofilizata za vse tri formulacije v časovnem obsegu 28 dni. Formulacije smo shranjevali pri temperaturah 2-8 °C in 25 °C. Opazili smo, da so vzorci shranjeni pri nižji temperaturi ohranili večjo stabilnost. Med njimi je vzorec z dodano laktozo ohranil najvišji titer. Liofilizirane bakteriofage smo napolnili v tržno pridobljene kapsule in nanje nanesli enterični premaz. Izvedli smo test raztapljanja v simulirani želodčni raztopini in jih nato raztopili v nevtralnem pufru TRIS-NaCl. Opazili smo, da je najvišji titer ohranil vzorec z dodano laktozo.

Jezik:Slovenski jezik
Ključne besede:bakteriofagi, gojenje, formulacije, liofilizacija, enkapsulacija
Vrsta gradiva:Magistrsko delo/naloga
Tipologija:2.09 - Magistrsko delo
Organizacija:BF - Biotehniška fakulteta
Založnik:[A. Rus]
Leto izida:2025
PID:20.500.12556/RUL-176034 Povezava se odpre v novem oknu
UDK:578.347(043.2)
COBISS.SI-ID:257879299 Povezava se odpre v novem oknu
Datum objave v RUL:19.11.2025
Število ogledov:76
Število prenosov:15
Metapodatki:XML DC-XML DC-RDF
:
Kopiraj citat
Objavi na:Bookmark and Share

Sekundarni jezik

Jezik:Angleški jezik
Naslov:Development of bacteriophage encapsulation using lyophylization
Izvleček:
The population of antibiotic-resistant bacteria is growing, so different approaches for their eradication are urgently needed. Destroying pathogens with bacteriophages has a great potential to reduce the incidence of bacterial infections such as salmonellosis. Currently, liquid formulations are in use, which are less stable than lyophilized and encapsulated ones. The aim of this Master's thesis was to prepare a more stable form of bacteriophages using lyophilization and encapsulation processes. We used a bacteriophage for the bacterium Salmonella enterica. We determined the optimal conditions for cultivation (OD600 and multiplicity of infection) of the bacteriophage on a small scale (20 and 100 mL) and multiplied them on a large scale (500 mL). We replaced the culture medium with TRIS-NaCl buffer using tangential flow filtration. We prepared formulations by adding excipients such as trehalose, lactose, L-leucine, and MgSO4. We measured the moisture content of the lyophilisate using analytical methods (Karl Fischer method and loss on drying), while the glass transition temperature (Tg) was determined using differential scanning calorimetry. We found that the moisture content in the sample was related to the Tg value. The sample with added lactose contained the lowest moisture content and had the highest Tg value. We tested the stability of the lyophilisate for all three formulations over a period of 28 days. The formulations were stored at 2-8 °C and 25 °C. We observed that the samples retained greater stability at lower temperatures. Among them, the sample with added lactose retained the highest titer. We filled commercially available capsules with lyophilized bacteriophages and applied an enteric coating to them. We performed a dissolution test in simulated gastric fluid and then dissolved them in neutral TRIS-NaCl buffer. We observed that the sample with added lactose retained the highest titer

Ključne besede:bacteriophages, propagation of bacteriophages, formulation, freeze drying, encapsulation

Podobna dela

Podobna dela v RUL:
Podobna dela v drugih slovenskih zbirkah:

Nazaj