Temperatni bakteriofagi (fagi) imajo kompleksen vpliv na strukturo bakterijskih združb, saj po eni strani omejujejo gostiteljsko populacijo preko litičnega cikla, po drugi strani pa lahko preko lizogene preobrazbe gostitelju omogočajo kompetitivno prednost. Fagi, znani pod imenom regulatorna stikala, omogočajo uravnavanje izražanja gena, ki je prekinjen zaradi vstavitve profaga v gostiteljski genom. V razmerah, ki zahtevajo izražanje tega gena, pride do izreza profaga, ki ne vodi v litični cikel. Kljub temu, da je bil ta pojav opisan pri številnih vrstah, med drugim pri SPbetavirusih SPβ in phi3T, pri katerih pride do izreza profaga med sporulacijo, je o regulatornem izrezu pri drugih pogojih ali pri drugih fagih tega rodu znanega malo. Na podlagi opažene izgube rojenja pri sevih s prekinjenim genom kamA smo se osredotočili na spremljanje, kako sprožitev teh celičnih procesov vpliva na izrez profagov phi3T in goe11 iz gena kamA. Za spremljanje vloge gena kamA pri rojenju, smo pripravili seve s prekinjenim genom kamA in izražanje spremljali s pomočjo novih fluorescenčno označenih sevov. Izrezovanje smo kvantificirali s pomočjo qPCR-analize pri različnih časovnih točkah med sporulacijo. Da smo med seboj lahko ločili spontano indukcijo in regulatorni izrez profaga, smo v istih časovnih točkah izvedli test nastanka plakov. Kljub temu, da smo pokazali, da med rojenjem ne pride do izražanja gena kamA, smo opazili zmanjšano sposobnost rojenja pri različnih mutantah kamA. Potrdili smo izražanje kamA med sporulacijo, hkrati pa, da kultivacija v gojiščih LB in NSM vodi v različno časovno dinamiko izražanje kamA in regulatornega izreza profagov phi3T oziroma goe11. Medtem ko opredelitev faga goe11 kot regulatorno stikalo predstavlja doprinos k razumevanju kompleksnega odnosa med bakteriofagi in njihovimi gostitelji, ostaja morebitna povezava med genom kamA in rojenjem nerazjasnjena.
|
