Plektin je povezovalni protein citoskeleta, ki se v osrednjem živčnem sistemu (OŽS) posebej izrazito izraža v astrocitih. V doktorski nalogi smo preučevali vlogo plektina v procesih, povezanih s fokalnimi adhezijami (FA) v mišjih astrocitih v kulturi. Z visoko-ločljivostno mikroskopijo smo pokazali, da se plektin z značilno prostorsko organizacijo izraža v FA, kjer se postopno kopiči v bolj zrelih FA. Nadalje smo pokazali, da plektin sodeluje pri dinamiki FA med razraščanjem astrocitov in vpliva na mobilnost posameznih proteinov v FA. Skladno z vlogo FA pri razraščanju in migraciji celic, so astrociti, ki niso izražali plektina, bili manj mobilni, bolj okrogli in imeli manjšo površino v primerjavi z astrociti divjega tipa. V teh celicah smo izmerili nižjo stopnjo kolokalizacije med FA in intermediarnim filamentom (IF) vimentinom. S kvantitativno analizo povezljivosti mrež citoskeleta smo ovrednotili, kako odsotnost plektina poruši arhitekturo IF in mikrotubulov. Omenjene spremembe je spremljala nižja elastičnost astrocitov brez plektina. Plektin kolokalizira z vodnim kanalom akvaporinom 4, zato smo preučili vlogo plektina v uravnavanju volumna astrocitov in razkrili, da plektin vpliva na kinetiko lokalnega nabrekanja celic. Astrociti se na patološke dražljaje odzivajo z reaktivno astrogliozo, za katero so značilne preureditve citoskeleta in povišano izražanje IF. V modelu reaktivnih astrocitov smo izmerili povišano izražanje plektina ter večje število in velikost FA. Ugotavljamo, da plektin uravnava organizacijo citoskeleta, dinamiko FA, mehanske lastnosti in lokalno nabrekanje astrocitov ter lahko prispeva k patološkim procesom OŽS.
|
