Pojav večkratno odpornih bakterijskih sevov predstavlja velik problem javnega zdravja in je zato nujno potrebno raziskovati alternativne metode za obvladovanje bakterijskih okužb. Naš cilj je bil preizkusiti učinek novega potencialnega sredstva - homogenata humane amnijske membrane (hAM) - na tvorbo biofilma izbranih proti antibiotiokom odpornih uropatogenih Escherichia coli (UPEC) sevov, vključno z večkratno odpornimi sevi. Poleg tega smo testirali seve UPEC na prisotnost genov, povezanih z virulenco. Uporabljenih je bilo deset različnih sevov UPEC, pri katerih smo testirali sposobnost tvorbe biofilmov. Glede na rezultate smo nato izbrali štiri seve UPEC (DL 9, DL 13, DL 14 in DL 88) za nadaljnjo preiskavo učinka homogenata hAM. Homogenate smo pripravili v fosfatnem pufru (PBS) ali ADMEM + F12 mediju. Kulture, ki so zrasle preko noči v tekočem gojišču Luria-Bretani (LB), smo redčili v svežem LB, PBS ali homogenatu hAM, inokulirali v mikrotitrsko ploščo s 96 vdolbinicami in 24 ur inkubirali pri 37 °C. Z barvanjem mase biofilma s kristalno vijoličnim in določanjem število celic v biofilmu smo ovrednotili učinek homogenata hAM na sposobnost sevov UPEC za tvorbo biofilma. Ugotovili smo, da imajo 3 od 4 testiranih sevov UPEC (DL9, DL13 in DL88) največjo zmogljivost za tvorbo biofilma v LB, srednjo zmogljivost v PBS in najnižjo zmogljivost za tvorbo biofilma v homogenatu hAM. Ugotovili smo, da homogenat hAM negativno vpliva na sposobnost tvorbe biofilmov pri teh sevih UPEC in ima zato lahko potencial kot alternativno terapevtsko sredstvo proti UPEC.
|
