izpis_h1_title_alt

Vzpostavitev modelnega sistema za proizvodnjo nanoteles v kvasovki Saccharomyces cerevisiae
ID Žnidar, Žan (Avtor), ID Petrovič, Uroš (Mentor) Več o mentorju... Povezava se odpre v novem oknu

.pdfPDF - Predstavitvena datoteka, prenos (1,21 MB)
MD5: E35FB7078BF0F53A89ED5CCE9F5F5582

Izvleček
Enodomenska protitelesa (nanotelesa) so v zadnjem desetletju vse bolj priljubljena, zahvaljujoč stabilnosti in enostavni strukturi. Ker sestojé iz zgolj ene polipeptidne verige, jih je možno pravilno zvite pripraviti v bakterijah ali kvasovkah, zato lahko ustvarimo produkcijske sisteme za proizvodnjo, ki so relativno poceni in dostopni. Kvasovka Saccharomyces cerevisiae sodi v skupino varnih organizmov (GRAS), zato so njihovi proteinski produkti široko uporabni – tudi v farmacevtiki. Kvasovke smo transformirali s plazmidom, ki je v vključku vseboval z zapisom za signalni peptid a faktorja spojen zapis za nanotelo proti proteinu bodice virusa SARS CoV 2, inducirali izražanje pod nadzorom inducibilnega promotorja, nato pa iz gojišča izolirali nanotelo. Protein se je uspešno izražal in izločal v gojišče, kar smo ovrednotili s prenosom western. V tej diplomski nalogi smo dokazali, da je predlagani modelni sistem primeren za proizvodnjo izbranega nanotelesa.

Jezik:Slovenski jezik
Ključne besede:nanotelo, Saccharomyces cerevisiae, sekrecija
Vrsta gradiva:Diplomsko delo/naloga
Tipologija:2.11 - Diplomsko delo
Organizacija:FKKT - Fakulteta za kemijo in kemijsko tehnologijo
Leto izida:2023
PID:20.500.12556/RUL-149139 Povezava se odpre v novem oknu
COBISS.SI-ID:165400835 Povezava se odpre v novem oknu
Datum objave v RUL:04.09.2023
Število ogledov:515
Število prenosov:102
Metapodatki:XML DC-XML DC-RDF
:
Kopiraj citat
Objavi na:Bookmark and Share

Sekundarni jezik

Jezik:Angleški jezik
Naslov:Creating a model system for production of nanobodies in yeast Saccharomyces cerevisiae
Izvleček:
Single-domain antibodies (nanobodies) have gained popularity in the last decade due to their stability and simple structure. Consisting of only one polypeptide chain, they can be synthesized by bacteria or yeasts as recombinant proteins, and still fold correctly. This allows us to create production systems which are relatively cheap and accessible. Yeast Saccharomyces cerevisiae belongs to GRAS organisms, thus allowing their protein products to have a broad range of applications – including in pharmacy. Upon transforming yeast cells with a plasmid containing a gene for a nanobody against the SARS CoV 2 spike protein following a gene for the alpha-factor leader peptide, the production under the control of an inducible promoter was induced, then the nanobody was isolated. Success of protein expression and secretion into the medium was evaluated using Western blot. In this research, we show that the suggested model system is applicable for production of the chosen nanobody.

Ključne besede:nanobody, Saccharomyces cerevisiae, secretion

Podobna dela

Podobna dela v RUL:
Podobna dela v drugih slovenskih zbirkah:

Nazaj