izpis_h1_title_alt

Produkcija fragmentov protiteles v kvasovki Pichia pastoris s kontinuirnim bioprocesom
ID Mlakar, David (Avtor), ID Podgornik, Aleš (Mentor) Več o mentorju... Povezava se odpre v novem oknu

.pdfPDF - Predstavitvena datoteka, prenos (1,86 MB)
MD5: BF6C34AA718C67ABD83D443CDA135E1D

Izvleček
V današnjem času so protitelesa in fragmenti protiteles eni izmed najbolj pogostih in zaželenih biotehnoloških produktov, pri čemer je Pichia pastoris pogosto izbrana kot produkcijski organizem, saj gre za enega bolj preučenih mikroorganizmov z izredno dobrimi lastnostmi za industrijsko produkcijo. Pri načrtovanju bioprocesne sheme se pogosto osredotočamo na podoben vzorec korakov, vendar pa je za vsak proces potrebno razviti celovit, individualen pristop. Pri našem delu smo se zato posvetili individualnemu pristopu optimizacije gojenja kvasovke vrste Pichia pastoris na majhni bioreaktorski skali z namenom produkcije protitelesnih fragmentov Fcab. S spreminjanjem priprave inokuluma in načina inokulacije smo postopek standardizirali, s spreminjanjem pogojev gojenja, kot je stopnja redčenja, pa smo uspešno s kontinuirnim postopkom gojili kulturo, ki je ostala produkcijsko aktivna. Slednje smo dokazali z analizami izolatov produkta z metodo SDS-PAGE. Reverzibilna vezava fragmenta Fcab s proteinom A nam je omogočila uporabo afinitetne kromatografske metode tako za namen njihove izolacije, hkrati pa smo z rezultati lahko ocenili tudi končno koncentracijo produkta v bioreaktorju.

Jezik:Slovenski jezik
Ključne besede:kemostat, Pichia pastoris, fragment protiteles Fcab, afinitetna kromatografija, SDS-PAGE
Vrsta gradiva:Magistrsko delo/naloga
Tipologija:2.09 - Magistrsko delo
Organizacija:BF - Biotehniška fakulteta
Kraj izida:Ljubljana
Založnik:[D. Mlakar]
Leto izida:2022
PID:20.500.12556/RUL-134630 Povezava se odpre v novem oknu
UDK:606:616-097.3:602.4:602.3:582.282.23(043.2)
COBISS.SI-ID:95344899 Povezava se odpre v novem oknu
Datum objave v RUL:22.01.2022
Število ogledov:1060
Število prenosov:268
Metapodatki:XML DC-XML DC-RDF
:
Kopiraj citat
Objavi na:Bookmark and Share

Sekundarni jezik

Jezik:Angleški jezik
Naslov:Production of antibody fragments in yeast Pichia pastoris in a continuous bioprocess
Izvleček:
Antibodies and their fragments are considered as one of the most desirable biotechnological products. Pichia pastoris is one of the more studied microorganisms, with extremely good properties for industrial production, which is the reason why it is often selected as the production organism of choice for such complex products. When constructing a bioprocess scheme, we often follow the same rules, but still have to take an individual approach with each one, as no organism or product responses the same way to an adjustment. In our work we took this individual approach of optimization for our small-scale cultivation of Pichia pastoris, that produced Fcab antibody fragments. With changes to the inoculum preparation and inoculation process, we were able to standardize the start of the process. Adjustments of the parameters, such as the dilution rate, enabled the continuous growth of Pichia pastoris which maintained its productivity. This was proven with the isolation of Fcab from the fermentation broth at the end of several successive small-scale bioprocesses and their successful detection with SDS-PAGE. Additionally, to the isolation, we also used the resulting data of HPLC detectors, to calculate the estimated concentrations of Fcab fragments in each vessel at the end of each successful process.

Ključne besede:chemostat, Pichia pastoris, Fcab antibody fragment, afinity chromatography, SDS-PAGE

Podobna dela

Podobna dela v RUL:
Podobna dela v drugih slovenskih zbirkah:

Nazaj