20.500.12556/RUL-99492 Vpliv tripsinizacije na celice Caco-2 Impact of trypsinization on Caco-2 cells Caco-2 celična linija se uporablja v številnih predkliničnih raziskavah. Ena izmed najbolj izraženih lastnosti celične linije Caco-2 je njihova zmožnost spontane diferenciacije. Zaradi različnega rokovanja s celično linijo Caco-2 med laboratoriji, v kar spada tudi uporaba različnih koncentracij tripsina ter čas izpostavljenosti celic tripsinu, se rezultati raziskav med laboratoriji lahko zelo razlikujejo in niso primerljivi. Preverili smo vpliv različnih koncentracij tripsina na celično viabilnost, prilagajanje celic na površino ter izražanje določenih genov z metodo verižne reakcije s polimerazo v realnem času z namenom, da bi ocenili vpliv tripsina na Caco-2 celično linijo ter v kakšni meri tripsin vpliva na razlike med rezultati, pridobljenimi med različnimi laboratoriji, in s pomočjo rezultatov izdelali univerzalen protokol, ki bi pomagal tudi drugim raziskovalcem, ki uporabljajo celično linijo Caco-2. Caco-2 cell line is widely used in different preclinical and clinical studies. One of the most prominent features of Caco-2 cell line is their ability of spontaneous differentiation. Due to different handling procedures of Caco-2 cell line, which include the use of different concentrations and variable time of the treatmeant with trypsin, results differ between laboratories which makes comparsion impossible. We tested the impact of different concentrations of trypsin on cell viability, attachment of the cells on surface and the expression of different genes with quantitave polymerase chain reaction method with purpose of evaluating the impact of trypsin on Caco-2 cell line and to what extent it affects the differences in results between laboratories. With the help of results we could make a standardized protocol which could help other scientists dealing with Caco-2 cell line. tripsinizacija celična viabilnost prilagajanje celic izražanje genov qPCR trypsinization cell viability cell adaption gene expression PCR true false false [N. Cuculić] Slovenski jezik Angleški jezik Magistrsko delo/naloga 2018-01-28 07:15:07 2018-01-28 07:15:10 2022-08-24 16:54:58 0000-00-00 00:00:00 2018 0 0 0000-00-00 NiDoloceno NiDoloceno NiDoloceno 0000-00-00 0000-00-00 0000-00-00 576.33:577.2(043.2) 150722 8908409 1811.pdf 1811.pdf 1 1719EDFC0EDC0A61BA8670D18D8E77DE 88bfe720cd646d8c6123bf03668a5fff4555cfc550a7829064e9c97ebc3beab8 940f4295-a1b4-11eb-a523-00155dcfd717 20.500.12556/rul/659e8801-7e39-45ed-80e6-bfbac897d834 https://repozitorij.uni-lj.si/Dokument.php?lang=slv&id=108965 Biotehniška fakulteta 0 0 0