20.500.12556/RUL-188061 Vpliv zunajceličnih veziklov mezenhimskih matičnih celic na poškodbe celičnega modela roženičnega endotela Impact of mesenchymal stem cell–derived extracellular vesicles on injury in a corneal endothelial cell model Roženični endotel je sestavljen iz enoslojnih heksagonalnih celic. Njegova glavna funkcija je vzdrževanje prosojnosti roženice. Zaradi omejene regenerativne sposobnosti lahko genetske bolezni, okužbe, vnetja ali poškodbe povzročijo nepopravljive okvaro oziroma disfunkcijo endotelnih celic, kar rezultira v poslabšanju vida. Zlati standard zdravljenja napredovalih bolezni endotela ostaja presaditev roženice, vendar je le-ta omejena z razpoložljivostjo ustreznih darovalcev, tveganjem za zavrnitev presadka in potrebo po dolgotrajnem pooperativnem spremljanju, kar spodbuja iskanje alternativnih terapevtskih pristopov, ki bi lahko zmanjšali poškodbe endotela in podprli regeneracijo tkiva. V magistrskem delu smo preučevali citoprotektivni učinek zunajceličnih veziklov iz mezenhimskih matičnih celic popkovnice v ex vivo modelu humanih darovanih roženičnih endotelov. Poškodbo endotela smo inducirali s pro-vnetnima citokinoma TNF-α in IFN-γ, ki sta povezana z vnetnimi procesi in izgubo endotelnih celic v različnih patoloških stanjih, vključno s presaditvijo roženice. Učinek zunajceličnih veziklov mezenhimskih matičnih celic popkovnice na endotel roženice smo ovrednotili s spekularno mikroskopijo in z določanjem viabilnosti endotelnih celic po barvanju s tripan modrim pod svetlobnim mikroskopu. Rezultati so pokazali statistično značilno manjši upad gostote endotelnih celic in nižji delež mrtvih celic v skupini, ki je bila tretirana z zunajceličnimi vezikli. Ti rezultati kažejo na možen citoprotektivni učinek zunajceličnih veziklov in predstavljajo izhodišče za nadaljnje raziskovanje njihove vloge pri ohranjanju funkcije roženičnega endotela. The corneal endothelium is composed of a single layer of hexagonal cells. Its main function is to maintain the transparency of the cornea. Due to its limited regenerative capacity, genetic disorders, infections, inflammation or injury can cause irreversible damage or dysfunction of the endothelial cells, resulting in impaired vision. The gold standard for the treatment of advanced endothelial diseases remains corneal transplantation; however, this is limited by the availability of suitable donors, the risk of graft rejection and the need for long-term post-operative monitoring, which is driving the search for alternative therapeutic approaches that could reduce endothelial damage and support tissue regeneration. In this Master’s thesis, we investigated the cytoprotective effect of extracellular vesicles derived from umbilical cord mesenchymal stem cells in an ex vivo model of human donor corneal endothelium. Endothelial damage was induced using the pro-inflammatory cytokines TNF-α and IFN-γ, which are associated with inflammatory processes and the loss of endothelial cells in various pathological conditions, including corneal transplantation. The effect of extracellular vesicles derived from umbilical cord mesenchymal stem cells on the corneal endothelium was assessed using specular microscopy and by determining endothelial cell viability following staining with trypan blue under a light microscope. The results showed a statistically significant reduction in the decline in endothelial cell density and a lower proportion of dead cells in the group treated with extracellular vesicles. These results suggest a possible cytoprotective effect of extracellular vesicles and provide a starting point for further investigation into their role in maintaining corneal endothelial function. Mezenhimske matične celice roženični endotel vnetni citokini TNF-α IFN-γ citoprotektivni učinek zunajcelični vezikli MSC(UC)-EV oftalmologija spekularna mikroskopija svetlobna mikroskopija ImageJ slikovna pretočna citometrija Mesenchymal stem cells corneal endothelium inflammatory cytokines TNF-α IFN-γ cytoprotective effect extracellular vesicles MSC(UC)-EV ophthalmology specular microscopy light microscopy ImageJ imaging flow cytometry true false false Slovenski jezik Angleški jezik Magistrsko delo/naloga 2026-09-18 07:18:29 2026-09-18 07:18:35 2026-09-19 04:29:55 0000-00-00 00:00:00 2026 0 0 0000-00-00 NiDoloceno NiDoloceno NiDoloceno 0000-00-00 0000-00-00 0000-00-00 289820 291657987 62919.pdf 62919.pdf 1 5996CACCA40383385CC29D34BA1011F3 07b275940feb633db4d4c5464079d3a602bb7ce4987f9df26d0e6d6b41b99010 5b5a041b-b320-11f1-8bc5-0050569b8976 https://repozitorij.uni-lj.si/Dokument.php?lang=slv&id=248058 Biotehniška fakulteta 0 0 0