20.500.12556/RUL-17710 Setting up a gene expression study for tissue cells by method of quantitative real-time PCR Gene expression analysis by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR) allows accurate and sensitive measurment of gene expression levels. However, a series of steps needs to be taken to ensure the relevance, accuracy, correct interpretation and repeatability of the RT-qPCR experiment. We describe here a simple experiment of determining relative gene expression for caspase 8 gene in chicken chondrocytes treated with an apoptosis inducing compound 5-fluorouracil. We use this example to point out some important guidelines in setting up a gene expression study in tissue cells, analyzing and interpreting the results and reporting on the findings. Analiza izražanja genov z metodo reverznega pomnoževanja in kvantitativne verižne reakcije s polimerazo v realnem času (RT-qPCR) omogoča natančno in občutljivo določanje nivoja izražanja tarčnih genov. Vendar je za zagotavljanje točnosti, natančne interpretacije in ponovljivosti eksperimenta, predvsem pa relevantnosti rezultatov, pomembno natančno poznavanje korakov postopka. V tem prispevku opisujemo enostaven poskus, v katerem smo v celični liniji kokošjih hondrocitov, ki smo jih tretirali s spojino 5-fluorouracil, ki sproži apoptozo, določili relativno izražanje gena, ki kodira encim kaspazo 8.Ta primer smo uporabili za izpostavitev nekaterih pomembnih smernic pri oblikovanju študije izražanja genov v tkivnih celicah, analizi in interpretaciji rezultatov ter oblikovanju zaključkov. molecular genetics RT-qPCR gene expression tissue cells molekularna genetika kvantitativni PCR v realnem času genetsko izražanje tkivne celice true false false Angleški jezik Slovenski jezik Delo ni kategorizirano 2014-07-11 13:54:48 2014-07-11 13:54:48 2022-05-20 03:44:58 0000-00-00 00:00:00 2012 0 0 Str. 19-28 št. 1 Letn. 100 2012 0000-00-00 NiDoloceno NiDoloceno NiDoloceno 0000-00-00 0000-00-00 0000-00-00 575 1581-9175 3081864 http://aas.bf.uni-lj.si/zootehnika/100-2012/PDF/100-2012-1-19-28.pdf 1 https://repozitorij.uni-lj.si/Dokument.php?lang=slv&id=17710 Biotehniška fakulteta Acta agriculturae Slovenica 0 0 0