20.500.12556/RUL-151213 Razvoj postopka prenosa bioprocesa za produkcijo humaniziranega monoklonskega protitelesa na raven industrijske proizvodnje Development of a procedure for the production of a biological active ingredient and scale-up to production levels Monoklonska protitelesa spadajo v razred bioloških oz. biotehnoloških zdravilnih učinkovin. Njihova proizvodnja poteka v bioreaktorjih, kot ekspresijski organizem pa se najpogosteje uporabljajo celice jajčnikov kitajskega hrčka (t.i. celice CHO). Razvoj bioprocesa se začne z eksperimenti na manjših bioreaktorskih volumenskih skalah, postopoma pa se izvajajo v vse večjih bioreaktorskih sistemih. Prenos v večje merilo obravnava ohranjanje bioprocesnih pogojev preko različnih bioreaktorskih volumenskih skal. Kot povečevalni kriterij smo pri prenosu v večje merilo uporabili ohranjanje konstantnega volumenskega vnosa moči (P/V). Pri tem smo si pomagali tudi z metodami in silico, ki jih imenujemo metode računalniške dinamike tekočin (ang. »computational fluid dynamics« ali »CFD«). Prvi sklop eksperimentov je potekal na sistemu Ambr250 in je bil namenjen iskanju kombinacije bioprocesnih parametrov, ki najbolje vpliva na celično rast, kvaliteto in titer produkta. Drugi sklop eksperimentov je potekal na sistemu BioBLU 3c, kjer smo testirali vpliv šestih različnih koncentracij glikomodulatorja na kvaliteto produkta. Naslednja dva bioprocesa sta bila izvedena na 200 L in 1000 L bioreaktorjih. Rezultate celične rasti, metabolizma, titra in kvalitete smo med različnimi volumenskimi skalami primerjali in ohranjanje konstantnega volumenskega vnosa moči prepoznali kot ustrezen povečevalni kriterij prenosa v večje merilo. In the scale-up process, we used the criterion of maintaining a constant power-to-volume ratio (P/V). We also employed computational fluid dynamics (CFD) methods to assist in this endeavor. The first set of experiments was conducted on the Ambr250 system and aimed to find the combination of bioprocess parameters that best influenced cell growth, product quality, and titer. The second set of experiments took place on the BioBLU 3c system, where we tested the impact of different concentrations of glycomodulator on product quality. The next two bioprocesses were carried out in 200 L and 1000 L bioreactors. We compared cell growth, metabolism, titer, and quality results across different volume scales and identified the maintenance of a constant power-to-volume ratio as a suitable scaling-up criterion. bioproces celice jajčnikov glikozilacija kitajski hrček metoda računalniške dinamike tekočin monoklonska protitelesa prenos v večje merilo volumenski vnos moči bioprocess Chinese hamster computational fluid dynamics method fed-batch bioprocess glycosylation monoclonal antibodies ovarian cells scaling-up volumetric power input true false false Slovenski jezik Angleški jezik Magistrsko delo/naloga 2023-10-01 07:16:02 2023-10-01 07:16:06 2023-10-02 14:57:30 0000-00-00 00:00:00 2023 0 0 0000-00-00 NiDoloceno NiDoloceno NiDoloceno 0000-00-00 0000-00-00 0000-00-00 232223 166646019 36807.pdf 36807.pdf 1 EFC950C595E4A16B4F3517E332B5382C bb31f999e8c076ee2ca2085e3990759ec8627cd08580b90f3ebe6f83f57888bd 9fba3b10-6019-11ee-930c-0050569b8976 https://repozitorij.uni-lj.si/Dokument.php?lang=slv&id=176124 Biotehniška fakulteta 0 0 0