20.500.12556/RUL-149078 Virulentni dejavniki sevov Porphyromonas gingivalis, izoliranih iz posameznikov s parodontalno boleznijo Virulence determinants of Porphyromonas gingivalis strains isolated from individuals with periodontitis Parodontalna bolezen je kronična vnetna bolezen obzobnih tkiv in predstavlja najpogostejši razlog za izgubo zob v odrasli dobi. Nastanek kompleksnih zobnih oblog in prisotnost parodontalnih bakterij sta glavna razloga za razvoj bolezni. Agresivnejši potek bolezni pogosto povezujemo z viruletnimi dejavniki oz. virulenco bakterije P. gingivalis. Namen magistrske naloge je bil oblikovati specifične začetne oligonukleotide za nabor virulentnih dejavnikov P. gingivalis in z metodo PCR opredeliti njihovo prisotnost in prevalenco v kliničnih izolatih slovenskih pacientov s parodontalno boleznijo. V 53 kliničnih izolatih sevov P. gingivalis smo ugotovili visok delež genov za viruletne dejavnike, ki vplivajo na medceličnino, eritrocite in celično signalizacijo gostitelja. Pri agresivnejših oblikah parodontitisa smo zaznali razlike v prevalenci virulentnih dejavnikov za pritrjanje. Pacienti z napredovano parodontalno boleznijo imajo v največjem deležu prisotno gensko različico dolgih fimbrij fimA II (83 %) in v najmanjšem različico fimA V (3,8 %), med katerima smo potrdili tudi statistično značilno negativno korelacijo (p – vrednost < 0,001). V dokaj visokem deležu (60,4 %) smo v posameznih izolatih zaznali prisotnost različnih genskih zapisov dolgih fimbrij fimA, kar lahko najverjetneje pripišemo prisotnosti različnih sevom P. gingivalis v posameznem vzorcu. Sklenemo lahko, da dolge fimbrije FimA predstavljajo potencialno zanimivo področje nadaljnjih raziskav v povezavi z agresivnejšimi oblikami parodontalne bolezni, pri čemer uporaba metode PCR ni najbolj zanesljiva, zaradi možnosti lažnih pozitivnih rezultatov. Periodontal disease is a chronic inflammation of the periodontal tissues and is the most common cause of tooth loss in adulthood. The formation of complex dental plaque and the presence of periodontal bacteria are the main reasons for the development of the disease. A more aggressive course is often associated with bacterium P. gingivalis and it's virulence factors. The aim of our work was to design specific oligonucleotides (primers) for a set of virulence determinants and to identify their presence and prevalence in clinical isolates from Slovenian patients with periodontitis using the PCR method. In 53 clinical isolates, we determined a high percentage of virulence factors that affect the extracellular matrix, erythrocytes, and host cell signaling. The greatest differences in prevalence were observed in virulence factors for adhesion. The majority of patients with advanced periodontitis carried the genetic variant of long fimbriae fimA II (83 %) but only 3,8 % the fimA V variant, between which we also confirmed a statistically significant negative correlation (p-value < 0,001). In individual isolates we discovered a relatively high procentage (60, 4 %) of multiple genotypes of fimA, which can most likely be attributed to different strains of P. gingivalis in each sample. In conclusion, long fimbriae FimA represent a potentially interesting area for further research in relation to more aggressive forms of periodontal disease, with the use of the PCR method being unreliable due to the possibility of false positive results. Porphyromonas gingivalis parodontalna bolezen genotipizacija virulentne determinante Porphyromonas gingivalis periodontitis genotipization virulent determinants true false false [Z. Bohar] Slovenski jezik Angleški jezik Magistrsko delo/naloga 2023-09-03 07:15:48 2023-09-03 07:15:52 2023-10-04 10:22:04 0000-00-00 00:00:00 2023 0 0 0000-00-00 NiDoloceno NiDoloceno NiDoloceno 0000-00-00 0000-00-00 0000-00-00 616.314-083(043.2) 228222 163241219 34415.pdf 34415.pdf 1 D2DAFDDC827B3B06AECEA63227337A6F bcfda0bd30081c25b5d8dfc0a50ce2b97f3ccc19a38671e923c9a755837ebac5 f2449397-4a18-11ee-af86-0050569b8976 https://repozitorij.uni-lj.si/Dokument.php?lang=slv&id=173465 Biotehniška fakulteta 0 0 0