20.500.12556/RUL-140039 Razvoj metode digitalne verižne reakcije s polimerazo za ugotavljanje vsebnosti bakterije Lactobacillus rhamnosus LGG® v liofiliziranih probiotičnih izdelkih Digital polymerase chain reaction method development for determination of Lactobacillus rhamnosus LGG® content in lyophilized probiotic products Probiotični izdelki so sestavljeni iz živih mikroorganizmov, ki ob zastopanju v pravih količinah povzročajo pozitivne učinke na gostitelja. V procesu proizvodnje probiotičnih izdelkov je eden od parametrov zagotavljanja kakovostnih probiotičnih izdelkov količina zastopanih koristnih probiotičnih bakterij v probiotičnih izdelkih. Mikrobiološko testiranje kakovosti probiotičnih izdelkov sloni na tradicionalnih metodah, ki temeljijo na rasti mikroorganizmov v tekočih in trdnih hranilnih gojiščih. Metode so pogosto nezanesljive, z dolgimi časi inkubacije in slabo selekcijo med mikroorganizmi. Ena izmed mikrobioloških tehnik je metoda štetja na ploščah, ki se uporablja za določanje količine bakterij v probiotičnem izdelku. Razvoj gre v smeri uporabe natančnejših in bolj zanesljivih molekularnih metod. Potencialna metoda za ugotavljanje števila točno določenih probiotičnih bakterij je digitalna PCR. Metoda omogoča absolutno določanje števila bakterij v vzorcu probiotičnega izdelka na podlagi flurescence. Tekom razvoja smo tehniko optimizirali do te mere, da lahko določamo celokupno količino probiotičnih bakterij v probiotičnem izdelku. Nova metoda predstavlja potencialno orodje za določanje količine probiotičnih bakterij v probiotičnih izdelkih, vendar jo bo za vsesplošno uporabo potrebno optimizirati do te mere, da bomo lahko z njo razlikovali med živimi in mrtvimi probiotičnimi bakterijami. Probiotic products are composed of living microorganisms that, when present in the right quantity, have beneficial effects on the host. One of the parameters for the quality of probiotic products during their production is the amount of beneficial probiotic bacteria present in them. Microbiological testing of probiotic product quality is based on traditional methods that measure the growth of microorganisms in liquid and solid culture media. Traditional methods are often unreliable, have long incubation times, and provide poor differentiation between microorganisms. Plate counting method is one of the microbiological techniques used to determine the number of bacteria in a probiotic product. Novel microbiological tests are based on the use of more accurate and reliable molecular methods. One possible method for determining specific probiotic bacteria is digital PCR. It allows the determination of the absolute number of bacteria in a sample of a probiotic product based on fluorescence. We have optimized the technique to the point where we can determine the total amount of probiotic bacteria in a probiotic product. The method is a potential tool for determining the number of probiotic bacteria in probiotic products but needs to be optimized for general use so that it can distinguish between live and dead probiotic bacteria. Lactobacillus rhamnosus LGG® dPCR kopij/ µL metoda štetja na plošči qPCR CFU Lactobacillus rhamnosus LGG® dPCR qPCR copies/µL method plate count colony forming units true true false [J. Štangelj] Slovenski jezik Angleški jezik Magistrsko delo/naloga 2022-09-10 07:16:49 2022-09-10 07:16:58 2022-09-16 04:13:07 0000-00-00 00:00:00 2022 0 Ljubljana 0 0000-00-00 NiDoloceno NiDoloceno NiDoloceno 0000-00-00 0000-00-00 0000-00-00 577.2 209018 120988419 24520.pdf 24520.pdf 1 D373BF002CC605758EF486826BEF346F 80e6e7c3d8dd7fd5bdb8c050bbc92f123fe5607411eb8ef4ef3c4cc3f8b027af bc5c19ac-30c7-11ed-92af-00155dcfd717 https://repozitorij.uni-lj.si/Dokument.php?lang=slv&id=160704 Biotehniška fakulteta 0 0 0