Priprava rekombinantnih bakterij vrste Escherichia coli za izražanje ciljnega proteina in prenos proizvodnje v večje merilo.Tumpej, Tadeja (Avtor) Podgornik, Aleš (Mentor) bioprocesprodukcija rekombinantnih proteinovEscherichia colivolumetrični koeficient prenosa kisikapovečevalne metodemešalni bioreaktorzaključni procesiimobilizirana kovinska afinitetna kromatografijaBioprocesništvo je bistveni del prehrambne, kemijske in farmacevtske industrije. Pri bioprocesih uporabljamo mikroorganizme, živalske, rastlinske in sesalske celice za produkcijo novih produktov. Rekombinantni proteini predstavljajo pomemben del farmacevtskih in biotehnoloških produktov. Kadar je le mogoče, jih izražamo v mikroorganizmih, ki imajo visoko specifično hitrost rasti ter visok doprinos, kar se odraža v visoki produktivnost. Glavni cilj magistrskega dela je bil razvoj učinkovitega procesa za pridobivanje rekombinantnega proteina v večjem merilu. Potrebno je bilo celovito obravnavanje procesa, saj le-to omogoča učinkovit razvoj proizvodnega procesa. Bioproces smo najprej okarakterizirali v Erlenmeyerjevih steklenicah na stresalniku. V Erlenmeyerjevih steklenicah smo določili volumetrični koeficient prenosa kisika (kLa), spremljali kinetiko rasti mikroorganizma Escherichia coli in produkcijo rekombinantnih proteinov. Razvili smo zaključne procese za izolacijo rekombinantnega proteina. S povečevalnimi metodami, ki so temeljile na konstantnem kLa in ostalih pogojih gojenja (gojišče, temperatura, vrsta bioprocesa), smo prenesli produkcijo proteinov v mešalni bioreaktor. Nismo dosegli enake kinetike rasti in produktivnosti procesa v obeh sistemih (Erlenmeyerjeva steklenica in mešalni bioreaktor). Dosegli smo podoben trend produkcije rekombinantnega proteina in produktivnost celic.[T. Tumpej]20172017-11-19 07:15:01Magistrsko delo/naloga98159UDK: 602.3/.4:579.84:604.4(043.2)VisID: 150063COBISS_ID: 8866937sl