Pridobitev in karakterizacija celic iz mrtvega tkiva miši.Pleterski, Ana (Avtor) Majdič, Gregor (Mentor) biotehnologijaposmrtno tkivomatične celiceizražanje genovkarakterizacija celicMatične celice pridobljene iz kadavrov predstavljajo obetajoč vir teh celic za različne raziskave kot tudi za regenerativno medicino, sploh kadar je njihovo pridobivanje iz živega darovalca omejeno oz. težavno. V naši raziskavi nas je zanimalo ali po 3, 6 in 9 dneh po smrti še lahko pridobimo celice iz posmtnega tkiva miši. Uporabili smo štiri različna tkiva in sicer, mišično in maščobno tkivo ter tkivo hipokampusa in vohalnih betičev. Prav tako smo preverjali vpliv temperature in način shranitve tkiva na pridobitev celic ter s pomočjo RT-qPCR preverjali izražanje določenih genov, ki so značilni za posamezno razvojno stopnjo celic. Ugotovili smo, da ima temperatura bistven vpliv, saj smo uspeli pridobiti celice le pri 4°C, medtem ko pri sobni temperaturi ne. Vohalni betiči so se izkazali kot tkivo, kjer smo v največ primerih uspeli pridobiti celice, najslabša rast pa je bila pri maščobnem tkivu. Pri nobenem tkivu nismo uspeli pridobiti celic 9 dni po smrti. Prav tako smo ugotovili, da način shranitve tkiva nima bistvenega vpliva. Analiza izražanja genov je pokazala zelo nizko izraženost preiskovanih genov. Izražali so se tako geni za celice, ki še niso končno diferencirane, kot za tiste, ki so. Eni izmed najpogosteje izraženih genov so bili Nanog, Cd34, Sox 7, Eno1, Msln, Gad2, Ptcra, Gad1, Gfap, Alb, Sftpb, G6pc in Tat. Ker ni bilo tipičnega vzorca izraženosti, ne moremo potrditi pluripotentnosti pridobljenih celic.[A. Pleterski]20172017-10-02 15:55:49Magistrsko delo/naloga96462UDK: 602.9:591.81:576.36/.38(043.2)VisID: 146452COBISS_ID: 8811129sl