Vnos in ugotavljanje markerskih genov pri hmelju (Humulus lupulus L.).Brinovec, Maša (Avtor) Luthar, Zlata (Mentor) biotehnologijatransformacijamarkerski geniselekcijski genihmeljanaliza transgenovInternodijskim izsečkom hmelja in kontrolnim listnim izsečkom tobaka smo s posredno metodo transformacije z Agrobacterium tumefaciens vnesli markerske gene: gusA, ZsGreen in DsRed-Express. Poskus adventivne regeneracije netransformiranega hmelja šestnajstih genotipov je pokazal največji odstotek regeneriranih izsečkov pri sorti 'Tettnanger' in sicer 70 %. Ostali genotipi so imeli odstotek regeneriranih izsečkov 0,8-10 % ali pa so bili neodzivni. Po transformaciji regeneracija genotipov hmelja ni presegla 10 %. Najboljšo regeneracijo je ohranila sorta 'Tettnanger', ki je bila odzivna tudi po transformaciji vsakega od uporabljenih markerskih genov. Transformiranim regenerantom tobaka in hmelja smo fenotipsko določili izražanje vnešenih transgenov in vgraditev tujih genov v genom s pomočjo PCR in agarozne elektroforeze. Transgen gusA se je pri tobaku izražal pri 60 % regenerantov in 8,1 % regenerantov hmelja, ZsGreen pri 74 % regenerantov tobaka in 4,3 % hmelja ter DsRed-Express pri 38 % regeneranrov tobaka in 6,1 % hmelja. Od vsake skupine smo naključno izbrali 10 regenerantov in jih s PCR testirali na prisotnost značilno namnoženih fragmentov. Pri transgenu gusA so se značilni fragmenti namnožili pri devetih regenerantih tobaka ter štirih hmelja, pri ZsGreen pri osmih regenerantih tobaka in sedmih hmelja ter pri DsRed-Express devetih regenerantih tobaka in šestih hmelja.[M. Brinovec]20172017-10-02 15:55:42Magistrsko delo/naloga96459UDK: 602.6:604.6:582.630.2(043.2)VisID: 146449COBISS_ID: 8811385sl