Priprava in analiza izražanja fuzij genov za virulentne dejavnike bakterije Escherichia coli in genov za fluorescentne proteinePetrič, Andreja (Avtor) Žgur Bertok, Darja (Mentor) patogene bakterijeEscherichia colivirulentni dejavnikigenska fuzijaizražanje genovfluorescentni proteinifenotipska heterogenostfluorescentna mikroskopijaSevi bakterije Escherichia coli so zelo raznoliki. Okužbe povzročajo sevi, ki so pridobili zapise za sintezo virulentnih dejavnikov. Pri komenzalih in patogenih sevih E. coli so za prvi stik z gostiteljem pomembni adhezini, za preživetje različni sistemi za prevzem železa in izogibanje imunskemu sitemu gostitelja. Patogeni bakterijski sevi imajo tudi zapisi za toksine, ki delujejo na gostiteljeve celice. V populaciji genetsko identičnih bakterijskih celic je poznan fenomen fenotipske variabilnosti. Heterogeno izražanje genov bakterijam nudi prednost v spremenljivem okolju, saj je tako del populacije pripravljen na hitre in neugodne spremembe. Namen naše raziskave je bil pripraviti genske fuzije promotorjev nekaterih genov za virulentne dejavnike in genov za fluorescentne proteine ter analizirati izražanje s fluorescentnim mikroskopom. Preučevali smo promotorje genov, clbA za fosfopanteteinil transferazo, cnf1 za toksin Cnf1 in cdtABC za citotoksin CDT. Genske fuzije smo v več korakih pripravili v plazmidnem vektorju pBAC in ga vnesli v celice bakterijskega seva MG1655. Z genskimi fuzijami smo ugotovili, da vse celice E. coli izražajo gen clbA. Ugotovili smo, da je izražanje genov za sintezo toksina Cnf1 in citotoksina CDT bakterije E. coli heterogeno, saj se izražata le v majhnem delu populacije.[A. Petrič]20172017-09-30 07:15:26Magistrsko delo/naloga96394UDK: 579.253.2:579.842:577.21VisID: 146368COBISS_ID: 4821368sl