Vezava izbranih fluorescenčno označenih egerolizinov, ostreolizina A in erilizina A na in vitro kulturo nediferenciranih živčnih celic in človeške celice ustne sluzniceGregorčič, Tanja (Avtor) Sepčić, Kristina (Mentor) Skočaj, Matej (Komentor) ostreolizin AEgerolizini so družina proteinov, katerih pomembna lastnost je vezava na specifične lipide in lipidne membranske mikrodomene, zato so primerno orodje za označevanje ali tarčno uničevanje specifičnih celičnih vrst. Ostreolizin A (OlyA) je egerolizin iz užitne gobe Pleurotus ostreatus. Za OlyA je značilno, da se specifično veže na naravne in umetne lipidne membrane, ki so obogatene s sfingomielinom in holesterolom. Pred kratkim so iz gobe Pleurotus eryngii izolirali protein erilizin A (EryA), ki se veže na ceramid fosfoetanolamin (CPE), sfingolipid prisoten v plazmalemi žuželk, v nekaterih parazitih in bakterijah. V okviru diplomskega dela smo preverili sposobnost vezave rekombinantnih fluorescenčno označenih egerolizinov OlyA-eGFP in EryA-mCherry na celice človeške ustne sluznice. Ugotovili smo, da se protein OlyA-eGFP veže na plazmalemo celic človeške ustne sluznice, medtem ko se EryA-mCherry na iste celice, za katere je znano, da ne vsebujejo CPE, ni vezal. Proučevali smo tudi vezavo OlyA-eGFP in EryA-mCherry na kulturo nediferenciranih živčnih celic, katerih plazmalema naj bi poleg prevladujočega sfingomielina in holesterola vsebovala tudi nizko količino CPE. Ugotovili smo, da se OlyA-eGFP veže na plazmalemo teh celic in da je torej primeren membranski označevalec s sfingomielinom in holesterolom obogatenih domen plazmaleme tudi nediferenciranih živčnih celic, medtem ko se protein EryA-mCherry zaradi verjetno prenizke količine CPE v plazmalemi nediferenciranih živčnih celic na te celice ni vezal in torej ni primerna molekula za označevanje CPE v plazmalemi.20172017-09-22 02:52:47Diplomsko delo/naloga95820COBISS_ID: 11725641sl