Kombinirano delovanje kanamicina in elektroporacije na proti kanamicinu odporen sev in na za kanamicin občutljiv sev bakterije Escherichia coliKramar, Klemen (Avtor) Klančnik, Anja (Mentor) Haberl Meglic, Saša (Komentor) Escherichia colielektroporacijaantibiotikikombinirano delovanjeOdpornost bakterij proti antibiotikom je vse večji problem v sodobnem svetu. V magistrskem delu smo preverili, ali elektroporacija poveča učinek kanamicina na proti kanamicinu odporni sev Escherichia coli TOP10-pN1, ki vsebuje plazmid pEGFP-N1 z genom nptII [aph(3′)-II] za odpornost proti kanamicinu, in za kanamicin občutljivi sev E. coli ER1821. Pri sevu TOP10-pN1 smo za elektroporacijo uporabili jakosti električnega polja 3,5, 4,5 in 5,5 kV/cm ter v rastno gojišče dodali kanamicin v koncentraciji 200 in 1600 µg/mL, pri sevu ER1821 pa smo za elektroporacijo uporabili električno polje jakosti 1,5, 2,5 in 3,5 kV/cm ter kanamicin v rastno gojišče dodali v koncentraciji 0,5 in 1 µg/mL. Kombinirano delovanje kanamicina in elektroporacije smo primerjali z delovanjem samo kanamicina, delovanjem samo elektroporacije in netretirano kontrolo. Kultivabilnost smo določili s štetjem kolonijskih enot (CFU)/mL, rezultate pa izrazili kot log₁₀(N/N₀). Pri kombinirani uporabi kanamicina in elektroporacije smo pri sevu E. coli TOP10-pN1 ugotovili večje zmanjšanje kultivabilnosti, zlasti pri višji koncentraciji kanamicina (1600 µg/mL). Pri tej koncentraciji je kombinirano delovanje pri vseh treh preizkušenih jakostih električnega polja povzročilo statistično značilno večje zmanjšanje kultivabilnosti kot sama elektroporacija, pri 3,5 in 5,5 kV/cm pa tudi kot sam kanamicin. Pri sevu E. coli ER1821 je bilo večje zmanjšanje kultivabilnosti pri kombiniranem delovanju ugotovljeno le pri najvišji preizkušeni jakosti električnega polja (3,5 kV/cm), kjer je kombinacija z 1 µg/mL kanamicina dodanega v gojišče povzročila statistično značilno večje zmanjšanje kultivabilnosti kot posamezna uporaba kanamicina ali elektroporacije. Pri izbranih eksperimentalnih parametrih je kombinirana uporaba kanamicina in elektroporacije povzročila večje zmanjšanje kultivabilnosti kot posamezna uporaba kanamicina ali elektroporacije, pri čemer je bil učinek odvisen od seva, koncentracije kanamicina in jakosti električnega polja.[K. Kramar]20262026-11-04 07:15:18Magistrsko delo/naloga190777UDK: 579.2:602.621:577.18VisID: 302998COBISS_ID: 303789059sl