Proučevanje sinergističnih učinkov zaviralcev tirozin kinaz Lyn in Lck z monoklonskimi protitelesi proti CD20 in vitroSimšič, Nika (Avtor) Mlinarič-Raščan, Irena (Mentor) Tomšič, Gašper (Komentor) kronična limfocitna levkemijadružina kinaz Srcmonoklonska protitelesa proti CD20zaviralci kinazsinergizemKronična limfocitna levkemija (KLL) je najpogostejša levkemija odraslih, pri kateri ima signalizacija preko B-celičnega receptorja ključno vlogo pri uravnavanju preživetja levkemičnih celic. Ker sta tirozinski kinazi Lyn in Lck pomembna regulatorja signalizacije B-celičnega receptorja, predstavljata obetavni terapevtski tarči za izboljšanje učinkovitosti zdravljenja z monoklonskimi protitelesi proti CD20. Osrednji namen magistrske naloge je bil ovrednotiti citotoksično delovanje sarakatiniba in HY-12072 v kombinaciji z rituksimabom in obinutuzumabom in vitro ter preveriti, ali kombinacije učinkovin izkazujejo sinergistično citotoksično delovanje. Ker je delovanje monoklonskih protiteles proti CD20 povezano z aktivacijo sistema komplementa, smo najprej proučili vpliv humanega seruma na s komplementom posredovano citotoksičnost rituksimaba in obinutuzumaba na celicah MEC-1. Z višanjem koncentracije dodanega humanega seruma iz 0 % na 20 % se je relativna metabolna aktivnost celic MEC-1 po tretiranju z rituksimabom znižala iz 92,0 % na 29,4 %, po tretiranju z obinutuzumabom pa iz 77,5 % na 27,1 %. Proučevali smo tudi citotoksični učinek sarakatiniba in HY-12072 na primarne celice KLL ter njuno kombinirano delovanje z rituksimabom in obinutuzumabom na celice MEC-1. Sarakatinib in HY-12072 sta povzročila koncentracijsko in časovno odvisno znižanje relativne metabolne aktivnosti primarnih celic KLL. Mediana vrednosti IC₅₀ sarakatiniba je po 24 urah znašala 22,52 μM, po 48 urah pa 8,86 μM, mediana vrednosti IC₅₀ HY-12072 pa 3,78 μM po 24 urah oziroma 1,63 μM po 48 urah. Pri vrednotenju kombiniranega delovanja sarakatiniba in HY-12072 z monoklonskima protitelesoma proti CD20 smo pri koncentracijah sarakatiniba 15 in 60 μM in koncentracijah HY-12072 0,15 in 0,6 μM z merjenjem metabolne aktivnosti v kombinaciji z rituksimabom in obinutuzumabom opazili primerljivo znižanje relativne metabolne aktivnosti celic kot posamezne učinkovine. Rezultati so bili skladni z aditivnim delovanjem kombinacije učinkovin in monoklonskih protiteles. Pridobljene ugotovitve prispevajo k boljšemu razumevanju odziva celic KLL na tretiranje s sarakatinibom in HY-12072 v kombinaciji z rituksimabom in obinutuzumabom ter predstavljajo izhodišče za nadaljnje raziskave novih kombiniranih terapevtskih pristopov.[N. Simšič]20262026-09-09 08:45:21Magistrsko delo/naloga187113UDK: 616.155.392(043.2)VisID: 128497COBISS_ID: 290654467sl