Priprava in karakterizacija izbranih aktinoporinom podobnih proteinov iz polžev rodu ConusZupančič, Urša (Avtor) Anderluh, Gregor (Mentor) aktinoporinom podobni proteinkonoporinimitilektiniporotvorni proteinAktinoporini (AP) so porotvorni toksini ožigalkarjev, ki sodelujejo pri lovu plena, prebavi in obrambi ter tvorijo transmembranske pore z vezavo na sfingomielin v celičnih membranah. Zaradi specifičnih membranskih interakcij imajo pomemben biotehnološki potencial v diagnostiki, terapijah in tehnologiji nanopor. Aktinoporinom podobni proteini (ALP) predstavljajo evolucijsko sorodno skupino, med katere sodijo tudi konoporini iz stožčastih polžev. V tej magistrski nalogi smo prvič rekombinantno izrazili ter biofizikalno in biokemijsko opredelili konoporina Eb2 in Eb3 iz vrste Conus ebraeus. Kljub izraziti strukturni podobnosti z AP smo ugotovili, da zaradi sprememb v ključnih vezavnih mestih specifično ne prepoznavata sfingomielina in ne izkazujeta porotvorne aktivnosti. V mediteranski klapavici Mytilus galloprovincialis poleg ALP-ja mitiporina-1 (MYTP1) najdemo tudi mitilektine, himerne proteine z lektinsko in proaerolizinsko domeno, ki specifično prepoznavajo glikane in tvorijo pore v obliki β-sodčka. Za podrobnejšo opredelitev njihove funkcije smo raziskali mitilektina MytiLec-3 in OrbiLec-1. Ugotovili smo, da je MytiLec-3 hemolitičen ter se specifično veže na glikanske epitope LacNAc, LacdiNAc in α-Gal, medtem ko OrbiLec-1 ne izkazuje vezave na glikane, niti hemolitične aktivnosti. S krio-elektronsko mikroskopijo smo v nativni membrani eritrocitov eksperimentalno potrdili nonamerno poro MytiLec-3, ki smo jo predhodno napovedali z uporabo modela AlphaFold3. Naši rezultati razkrivajo funkcionalno raznolikost ALP-jev in mitilektinov ter poudarjajo njihov potencial za uporabo v diagnostiki, biosenzoriki in farmaciji.[U. Zupančič]20262026-09-09 07:18:10Magistrsko delo/naloga187075UDK: 577.112:594.347(043.2)VisID: 287562COBISS_ID: 290476291sl