Imunski odziv v steni sečnega mehurja miši po poškodbi s ciklofosfamidomHudobivnik, Laura (Avtor) Zupančič, Daša (Mentor) sečni mehurmišji model akutnega nebakterijskega cistitisaciklofosfamidimunski odzivlimfociti TimunofluorescencamikroskopijaCiklofosfamid (CP) je alkilirajoči citostatik, ki se uporablja pri zdravljenju različnih vrst raka in avtoimunih obolenj. Njegov najpomembnejši neželeni učinek je hemoragični cistitis, ki nastane zaradi toksičnega metabolita akroleina. Kljub številnim raziskavam akutnega nebakterijskega cistitisa vloga limfocitov T pri imunskem odzivu v steni sečnega mehurja po poškodbi s CP še ni povsem pojasnjena. V diplomskem delu smo raziskali vpliv intraperitonealne (i.p.) aplikacije ciklofosfamida na prisotnost in porazdelitev limfocitov CD4+ in CD8+ v steni sečnega mehurja miši. Uporabili smo mišji model akutnega nebakterijskega cistitisa, pri katerem smo mišim injicirali enkratni odmerek 150 mg CP/kg telesne teže miši (skupina CP150) ali 300 mg CP/kg telesne teže (skupina CP300), kontrolna skupina pa je prejela i.p. injekcijo fiziološke raztopine. Analizirali smo histološke spremembe v steni mehurja na parafinskih rezinah, obarvanih s hematoksilinom in eozinom, prisotnost in lokalizacijo limfocitov T pa določili z imunofluorescenčnim označevanjem. Gostoto limfocitov T smo določili s kvantitativno analizo in ovrednotili s statistično analizo. Po aplikaciji CP smo opazili poškodbe urotelija in lamine proprije, med drugim luščenje urotelija, hiperplazijo, edem, vnetni infiltrat in hemoragijo. Morfološke spremembe so bile bolj izrazite pri skupini CP300. Z imunofluorescenčno mikroskopijo smo pokazali, da je bila v vseh skupinah lokalizacija limfocitov CD4+ in CD8+ pretežno v lamini propriji. Za nižji odmerek CP je bilo značilno povečanje števila limfocitov CD4+, medtem ko rezultati števila limfocitov CD8+ niso bili enoznačni. Pri višjem odmerku je prišlo do zmanjšanega števila obeh populacij limfocitov T. Statistična analiza je za limfocite CD4+ in CD8+ pokazala statistično značilne razlike med skupinama, ki sta prejeli različna odmerka CP, kar kaže na od odmerka odvisen učinek CP na lokalni imunski odziv. Za boljše razumevanje vloge limfocitov CD4+ in CD8+ pri cistitisu, induciranem s CP, so potrebne nadaljnje raziskave z večjim številom vzorcev, dodatnimi označevalci imunskih celic in molekularnimi metodami.20262026-09-03 14:40:03Diplomsko delo/naloga186634VisID: 26114sl