Analiza globalne metilacije citozina v DNA pri različnih genotipih konoplje (Cannabis sativa) gojenih v pogojih in vivo in in vitro z metodo HPLCBonin, Luka (Avtor) Murovec, Jana (Mentor) Križman, Mitja (Komentor) globalna DNA metilacijaHPLCkonopljaepigenetske spremembe5-metilcitozinKonoplja (Cannabis sativa L.) je gospodarsko vse pomembnejša rastlinska vrsta, pri kateri mikropropagacija omogoča hitro pridobivanje enotnega rastlinskega materiala. Daljše gojenje in vitro lahko sproži epigenetske spremembe, med katerimi je osrednjega pomena globalna metilacija DNA. Namen naloge je bil z metodo HPLC-UV določiti delež 5-mC v genomski DNA štirih genotipov konoplje ter primerjati matične rastline, poganjke po prvi in četrti subkultivaciji na gojišču DKW brez dodatka in z dodatkom TDZ, poganjke na gojišču za izdolževanje, aklimatizirane rastline in vegetativne klone. Analiza deleža 5-mC v genomu rastlin je pokazala, da so razlike že prisotne na ravni matičnih rastlin, pri čemer se je skozi subkultivacije pri polovici vseh genotipov pojavil trend hipometilacije. Učinek TDZ ni bil enoznačen ne v smeri metilacije ne v velikosti in je izkazoval veliko odvisnost od genotipa rastline ter njene razvojne stopnje. Učinek gojenja v tkivnih kulturah je ostal zaznaven tudi po aklimatizaciji in se je kazal kot višja raven 5-mC pri večini genotipov po prehodu v odrasle rastline v primerjavi z vegetativno pridobljenimi kloni. Rezultati potrjujejo, da genotip ključno uravnava tako izhodiščno raven kot dinamiko globalne metilacije DNA med mikropropagacijo konoplje, metoda HPLC pa se je izkazala za dovolj občutljivo za zaznavo teh razlik.20262026-08-23 07:16:53Diplomsko delo/naloga185915VisID: 285496COBISS_ID: 288835843sl