Študij kromatografskega obnašanja modelnih proteinov na različnih kationsko-izmenjevalnih monolitnih kolonahKolenc, Eva (Avtor) Pompe, Matevž (Mentor) Šarac, Bojan (Komentor) kationsko-izmenjevalna kromatografijamonolitna kolonaGH-IR modelnelinearen Van ‘t Hoffov grafizotermna titracijska kalorimetrijaločba proteinovmultimodalna kromatografijaKationsko-izmenjevalna kromatografija je ena ključnih metod za ločevanje in čiščenje proteinov, pri kateri na zadrževanje proteinov poleg osnovnih elektrostatskih interakcij pogosto vplivajo tudi ostale fizikalno-kemijske lastnosti ionsko-izmenjevalne skupine in matrice kromatografske kolone. Namen dela je bil primerjati delovanje treh različnih kationsko-izmenjevalnih monolitnih kolon, CIM SO3, CIM SO4 1 in CIM SO4 2, ki so se razlikovale po tipu izmenjevalne skupine, gostoti liganda in sestavi matrice. Zanimalo nas je, kako navedene razlike vplivajo na mehanizem adsorpcije dveh modelnih proteinov – citokroma c in lizocima. Kromatografsko obnašanje modelnih proteinov smo najprej preučili z elucijo v linearnem solnem gradientu. Ionsko-izmenjevalni proces smo nato ovrednotili z uporabo GH-IR modela. Sledila je termodinamska analiza adsorpcije z uporabo nelinearne Van ‘t Hoffove enačbe, najprej na bazičnih aminokislinah nato še na obeh modelnih proteinih. Na koncu smo pridobljene trende termodinamskih parametrov preverili še z izotermno titracijsko kalorimetrijo. Rezultati študije so jasno pokazali razlike v mehanizmu adsorpcije modelnih proteinov in s tem razlike v kromatografskih lastnostih uporabljenih ionskoizmenjevalnih kolon. Pri tem je najbolj izstopala kolona CIM SO4 2, ki je v primerjavi z ostalima kolonama izkazovala tudi multimodalne lastnosti.20262026-07-02 14:10:03Magistrsko delo/naloga184249VisID: 25742COBISS_ID: 286567171sl