Vplivi kanabidiola na fetalne humane astrociteŠtok, Veronika Zala (Avtor) Jurič, Damijana Mojca (Mentor) astrocitikanabidiolfitokanabinoidiendokanabinoidni sistemcitotoksičnostcelični metabolizemKanabidiol (CBD) je fitokanabinoid, naravno prisoten v rastlinah rodu Cannabis (konoplja). Kljub njegovi naraščujoči priljubljenosti, molekularni mehanizmi njegovega delovanja še niso v celoti raziskani. Toksični učinki ∆9-tetrahidrokanabinola (THC) so znani že nekaj časa, vpliv CBD na razvijajoče se možgane pa ostaja nepojasnjen. V okviru magistrske naloge smo želeli preučiti vplive CBD na fetalne humane astrocite iz možganske skorje v kulturi. Predvidevali smo, da CBD deluje citotoksično, znižuje celični metabolizem astrocitov in vstopa v interakcije z endogenim kanabinoidnim sistemom (EKS) humanih fetalnih astrocitov. Celice smo izpostavili 0,5; 1 ali 5 µM CBD v različnih časovnih intervalih (1 do 24 ur). Citotoksičnost smo preverjali s testom viabilnosti AlamarBlue®, z merjenjem aktivnosti laktat dehidrogenaze (LDH) zunaj celic in merjenjem aktivnosti kaspaze-3/7, določili pa smo tudi vsebnost proteinov v celicah. CBD je v vseh preučevanih koncentracijah povzročil znižanje viabilnosti celic. Aktivnost LDH je bila povišana pri višjih koncentracijah (1 in 5 µM), iz česar sklepamo, da je bila motena integriteta celične membrane, kar je značilno za nekroptozo in nekrozo. Pri istih koncentracijah je CBD povzročil upad vsebnosti proteinov in povišano aktivnost kaspaze-3/7, ki ima osrednjo vlogo v procesu apoptoze. Vpliv na celični metabolizem smo preučevali z merjenjem znotrajcelične koncentracije ATP in merjenjem sprememb mitohondrijskega membranskega potenciala (∆Ψm), pri čemer smo ugotovili, da je CBD povzročil hiter upad količine ATP ter upad ∆Ψm po 24-urni izpostavitvi. Da bi preverili, ali CBD vstopa v interakcije z EKS, smo preučili vpliv različnih koncentracij CBD na izražanje genov komponent EKS. CBD je znižal ekspresijo genov CNR1 in CNR2 za receptorje CB1 in CB2, ter zvišal ekspresijo genov TRPV1 in MGLL, ki kodirata receptor TRPV1 in encim MAGL. Zaključili smo, da CBD deluje citotoksično in znižuje presnovno aktivnost celic ter vpliva na funkcijo EKS fetalnih humanih astrocitov v kulturi.[V. Z. Štok]20252026-01-11 07:15:07Magistrsko delo/naloga177874UDK: 576.34:57.083.36(043.2)VisID: 278527COBISS_ID: 264244995sl