Vloga transkripcijskega dejavnika NANOG pri razvoju karcinoma materničnega vratuKoren, Miha (Avtor) Strojan Fležar, Margareta (Mentor) Poljak, Mario (Komentor) ploščatocelični karcinom materničnega vratuploščatocelična intraepitelijska lezijacervikalna intraepitelijska neoplazijatumorske matične celiceNANOGPloščatocelični karcinom materničnega vratu (PKMV) se razvije preko več stopenj predrakavih sprememb ploščatih celic materničnega vratu (MV) in je večinoma povezan z okužbo s človeškimi papilomavirusi (HPV, angl. human papillomaviruses). Predrakave spremembe ploščatega epitelija MV delimo v ploščatocelične intraepitelijske lezije nizke stopnje (PIL-NS) in ploščatocelične intraepitelijske lezije visoke stopnje (PIL-VS). PIL-VS razdelimo v cervikalno intraepitelijsko lezijo stopnje 2 in stopnje 3 (CIN 2 in CIN 3). Raziskave na področju PKMV so potrdile obstoj tumorskih matičnih celic (TMC) in izražanje označevalcev TMC, med drugim izražanje transkripcijskih dejavnikov NANOG, SOX2 in OCT3/4. V nalogi smo raziskali vlogo in regulacijo NANOG na beljakovinskem, RNA in DNA nivoju v karcinogenezi PKMV ter njegov diagnostični pomen. V raziskavo smo vključili 40 tkivnih vzorcev PIL/CIN in PKMV s priležnim nedisplastičnim ploščatim epitelijem MV (kontrole, K), skupno 40 bolnic oziroma 80 tkivnih vzorcev. Uporabili smo imunohistokemične metode, genotipizacijo HPV, kvantitativno verižno reakcijo s polimerazo in sekvenciranje po Sangerju. Beljakovini NANOG in SOX2 sta bili bolj izraženi v PIL/CIN in PKMV kot v K, njuno izražanje je naraščalo s stopnjo v karcinogenezi PKMV. Pri vseh bolnicah smo potrdili okužbo s HPV. Gen NANOG je bil najbolj izražen v PKMV. Regulatorja OCT3/4 in RoR sta pokazala pozitivno korelacijo z izražanjem NANOG, miR-145 pa negativno korelacijo. Spremenjene metilacije promotorja NANOG nismo zaznali. Naši rezultati kažejo višje izražanje beljakovin NANOG in SOX2 v PIL/CIN kot v K in v PIL-VS kot v PIL-NS. Višje izražanje beljakovine SOX2 smo ugotovili v PIL-VS/CIN 3 kot v PIL-VS/CIN 2. Izražanje NANOG mRNA se je v karcinogenezi razlikovalo od izražanja beljakovine NANOG, kar kaže na vlogo regulacije na posttranskripcijskem nivoju, med drugim z miR-145 in RoR, poleg regulacije z beljakovinami. Prispevali smo nova spoznanja o vlogi regulatorjev NANOG v karcinogenezi PKMV in potrdili možnost uporabe NANOG in SOX2 kot dodatnih označevalcev v diagnostiki PIL/CIN.20252025-11-16 07:15:16Doktorsko delo/naloga175973VisID: 37159sl