Vloga proteina MAGE C2 pri adheziji celic glioblastomaBanovšek, Nika (Avtor) BREZNIK, BARBARA (Mentor) glioblastomLN-229MAGE C2obsevanjecelična adhezijaproliferacijaGlioblastom (GBM) je najpogostejši in najagresivnejši primarni možganski tumor pri odraslih. Zaradi svoje heterogenosti in pospešene invazije celic v centralnem živčnem sistemu je odporen na obstoječe oblike zdravljenja, kot so kirurška odstranitev, kemoterapija in radioterapija. Zaradi slabe prognoze želimo bolje razumeti napredovanje GBM in najti biološke označevalce in tarče, s katerimi bi izboljšali obravnavo bolnikov. Družino genov z melanomom povezanih antigenov (angl. melanoma associated antigen, MAGE) delimo na tip 1 in 2. Zadnje raziskave kažejo, da MAGE tipa 1 v različnih kombinacijah zagotavljajo zaščito pred različnimi stresnimi dejavniki, potencialno tudi zaščito rakavih celic pred zdravljenjem s kemoterapijo in z obsevanjem. Namen magistrskega dela je bil ugotoviti vpliv obsevanja in MAGE C2 na viabilnost, proliferacijo in adhezijo celic GBM. Obenem smo želeli oceniti njun vpliv na izražanje različnih adhezijskih molekul (CAM), proteinov zunajceličnega ogrodja (ECM) in citoskeleta, ki igrajo ključno vlogo pri napredovanju GBM. Uporabili smo celični liniji GBM LN-229 s stabilnim izražanjem proteina MAGE C2 in kontrolni celični liniji brez izraženega MAGE C2. Vpliv obsevanja in izražanje MAGE C2 smo analizirali s štetjem viabilnih celic ter kvantifikacijo adhezije celic po štiridnevnem frakcioniranem obsevanju z 2,5 Gy. S pomočjo prenosa po westernu in imunodetekcijo smo opazovali, kako obsevanje in MAGE C2 vplivata na izražanje proteinov CAM, ECM in citoskeleta. Naše ugotovitve kažejo, da frakcionirano obsevanje zmanjša proliferacijo in povečajo adhezijo celic GBM. Prav tako je obsevanje v celicah vplivalo na zmanjšanje izražanja celokupnega N-kadherina in upad alfa1-verige glede na celokupen kolagen I in III. Izražanje MAGE C2 v celicah ni vplivalo na občutljivost celic GBM na obsevanje in na adhezijo celic, saj ni prišlo do spremenjene celične proliferacije po obsevanju ter celične adhezije v celicah z izraženim MAGE C2 v primerjavi s celicami brez MAGE C2. Celice z izraženim MAGE C2 so imele napram celicam brez izraženega MAGE C2 nižje nivoje izražanja celokupnega N-kadherina in nižje razmerje cepljene in celokupne oblike ter alfa1-verige in celokupne oblike kolagena I in III. Statistične analize prenosa po westernu so pokazale, da obsevanje in MAGE C2 vplivata na raven izražanja N-kadherina ter kolagena I in III. Rezultati nakazujejo, da MAGE C2 vpliva na izražanje proteinov ECM in CAM. MAGE C2 tako predstavlja potencialen dejavnik, ki lahko posredno vpliva na migracijo in invazijo celic GBM.20252025-09-15 13:25:02Magistrsko delo/naloga173298VisID: 25468COBISS_ID: 257286403sl