Karakterizacija inhibicije treonin dehidrogenaze s specifičnimi derivati pirazolaTušek, Marcel (Avtor) Novinec, Marko (Mentor) L-treonin dehidrogenazabiofilmiderivati pirazolPirazol in njegovi derivati postajajo vse bolj pomembni v svetu medicine zaradi svojega dokazanega protimikrobnega delovanja. Razvoj različnih derivatov povečuje verjetnost, da bodo nekateri uporabni pri razvoju novih antibiotikov. Derivat pirazola, 4‑(2‑aminoetil)-1-(piridin-2-il)-1H-pirazol-5-ol (I1), zavira rast bakterije Escherichia coli in inhibira aktivnost encima L-treonin dehidrogenaza (TDH). Ta encim je ključnega pomena za metabolizem aminokislin in tvorbo biofilma. TDH v človeku nima funkcionalnega homologa, zato bi lahko spojina I1 bila osnova za razvoj novih antibiotikov. Cilj raziskovalnega dela je bil preučiti, kako različni derivati pirazola vplivajo na inhibicijo aktivnosti TDH in ali vplivajo tudi na tvorbo biofilmov. Za delovanje encima je potreben kofaktor NAD+, ki se ob reakciji pretvori v NADH, kar omogoča fluorimetrično spremljanje aktivnosti. Uporabili smo rekombinantni TDH ter spremljali njegovo aktivnost v prisotnosti različnih derivatov pirazola. Med testiranimi derivati je bil najbolj potenten derivat I1. Podobno inhibitorno aktivnost je imel tudi derivat I2, vendar njegova slaba topnost ni omogočila testiranja pri višjih koncentracijah. Preizkusili smo tudi vpliv derivatov na tvorbo biofilmov, pri čemer smo ugotovili, da vsi derivati zavirajo tvorbo biofilmov. Le I1 in I2 pa sta delovala neposredno na aktivnost TDH. Na podlagi tega ne moremo z gotovostjo potrditi povezave med inhibicijo TDH in zaviranjem tvorbe biofilma.20252025-07-02 13:32:05Diplomsko delo/naloga170161VisID: 25521COBISS_ID: 243067651sl