Proučevanje vpliva zamenjave homofenilalanina z njegovimi strukturnimi analogi na agonistično aktivnost dezmuramilpeptidov na nukleotid-vezočo oligomerizacijsko domeno vsebujoči protein 2Beguš, Maša (Avtor) Jakopin, Žiga (Mentor) Janež, Špela (Komentor) Receptor NOD2dezmuramilpeptidiagonistično delovanjeanalogiimunski odzivImunski sistem nas varuje pred tujki, ki ogrožajo naš organizem. Za aktivacijo imunskega odziva so ključni receptorji, ki prepoznajo molekulske strukture, značilne za razne povzročitelje okužb. Mednje sodijo tudi receptorji z nukleotid-vezočo oligomerizacijsko domeno 2 (NOD2), ki se nahajajo predvsem v imunskih celicah in po prepoznavi liganda sprožijo vnetni odziv. Najmanjša enota bakterijskega peptidoglikana, ki aktivira NOD2, je muramil dipeptid. Ob vezavi se sprožijo mehanizmi prirojene in posredno tudi pridobljene imunosti, zato imajo sintezni NOD2 agonisti velik terapevtski potencial. Poleg vloge adjuvansov v cepivih bi se lahko uporabljali tudi v protitumorni terapiji in pri zdravljenju nekaterih infekcijskih bolezni, v zadnjem času pa veliko obetajo tudi kot potencialne učinkovine v terapiji nevrodegenerativnih bolezni. V sklopu magistrske naloge smo si prizadevali izboljšati NOD2 agonistično delovanje dezmuramilpeptidne spojine vodnice. Sintetizirali smo 12 različnih analogov trans-feruloilnega derivata tripeptida hPhe-L-Val-D-Glu, pri čemer smo aminokislino homofenilalanin nadomestili z njenimi strukturnimi analogi. Prvi sklop sprememb je vključeval vpeljavo različnih funkcionalnih skupin na aromatski obroč, v nadaljevanju smo aromatski obroč zamenjali s cikloheksilnim, nazadnje pa smo pripravili analoge z uvedeno dodatno metilensko skupino. Agonistično delovanje sintetiziranih spojin na receptor NOD2 smo določili s testom na celicah HEK-Blue hNOD2. Rezultati so potrdili, da so spojine z uvedeno desnosučno aminokislino boljši agonisti od tistih z levosučno konfiguracijo. Strukture štirih sintetiziranih produktov, ki so izkazali EC50 v pikomolarnem koncentracijskem območju, nakazujejo na to, da so za agonistično delovanje ključne hidrofobne interakcije homofenilalaninskih analogov v vezavnem žepu receptorja. Najboljši rezultat je na testiranju pokazala spojina, ki je vsebovala analog homofenilalanina z dodatno metilensko skupino v stranski verigi (EC50 = 310 pM). Z rezultati smo dodatno osvetlili odnos med strukturo in delovanjem agonistov NOD2. Sintetizirane spojine predstavljajo izhodišče za nadaljnje vrednotenje, ugotovitve glede SAR pa bodo dodatno vodilo pri optimizaciji teh spojin v prihodnosti.20252025-06-13 08:45:26Magistrsko delo/naloga169870VisID: 114829sl