Vpliv različnih strategij formulacije bakteriofagov na njihovo stabilnostDokl, Gašper (Avtor) Petrovič, Uroš (Mentor) Smrekar, Frenk (Komentor) bakteriofagiformulacijasušenje z razprševanjemformulacija v raztopinifagna terapijaBakteriofagi so virusi, ki gostujejo v bakterijah. Dandanes je zamisel o zdravljenju bakterijskih okužb z bakteriofagi znova postala aktualna, saj se pojavlja vse več proti antibiotikom odpornih bakterij. Cilj magistrske naloge je bil testiranje različnih strategij formulacij. Uporabili smo dva bakteriofaga: bakteriofag za bakterijo Klebsiella pneumoniae (KP49) in bakteriofag za bakterijo Escherichia coli (S18036). Za testiranje formulacije smo najprej testirali namnoževanje bakteriofagov v manjšem obsegu, rezultate pa nato uporabili za postopek namnoževanja v bioreaktorju. Po namnoževanju smo bakteriofage koncentrirali in diafiltrirali s tangencialno filtracijo (TFF; angl. tangential flow filtration) skozi membrano z velikostjo por 100 kDa. Nato smo pripravili različne bakteriofagne pripravke; v raztopini oziroma posušene pripravke. Pri pripravkih v raztopini smo testirali vpliv dodajanja kompatibilnih topljencev oziroma magnezijevega iona na stabilnost bakteriofagov. Ugotavljali smo tudi učinek temperature shranjevanja na koncentracijo funkcionalnih bakteriofagov in opazili razlike med bakteriofagoma KP49 in S18036, pri čemer je bil slednji bolj stabilen. Pri testiranju posušenega pripravka smo uporabili sušenje z razprševanjem, kjer smo najprej testirali vpliv temperature na izkoristek. Iz testiranih pogojev smo izbrali temperaturo sušenja z najboljšim izkoristkom, to je 60 °C. Nato smo s sušenjem pri 60 °C pridelali bakteriofagni pripravek v prahu in pri različnih časih testirali shranjevanje pri različnih temperaturah. Podobno kot pri formulacijah v raztopini smo ugotovili, da je bakteriofag S18036 odpornejši od KP49. Ugotovili smo, da je pri bakteriofagu KP49 preživetje boljše pri pripravkih v raztopini, medtem ko je preživetje bakteriofaga S18036 primerljivo pri vseh formulacijah. Na podlagi rezultatov ugotavljamo, da določena formulacija ni splošno primernejša za vse bakteriofage, ampak je potrebno najprimernejšo določiti za specifičen bakteriofag.[G. Dokl]20242024-12-15 07:15:14Magistrsko delo/naloga165955UDK: 602.3:578.347VisID: 255842COBISS_ID: 219138307sl