Določanje katalitične aktivnosti podenot β5c in β5i cirkulirajočih proteasomov v vzorcih krvi bolnikov s kroničnimi vnetnimi črevesnimi boleznimiKorbar, Karmen (Avtor) Gobec, Martina (Mentor) Smrdel, Lara (Komentor) cirkulirajoči proteasomikronične vnetne črevesne boleznibiokemični označevalciProteasomi so del ubikvitin-proteasomskega sistema, ki je odgovoren za razgradnjo večine znotrajceličnih proteinov. Poznamo več vrst proteasomov, najbolj pogost pa je konstitutivni proteasom in imunoproteasom. Proteasome, ki se nahajajo v ekstracelularnem prostoru, imenujemo cirkulirajoči proteasomi. Njihova koncentracija v plazmi je povišana pri različnih patoloških stanjih, zaradi česar predstavljajo morebitne nove biološke označevalce za spremljanje teh bolezni. V magistrski nalogi smo želeli raziskati, ali bi lahko bili uporabni tudi pri diagnostiki kroničnih vnetnih črevesnih boleznih, pri katerih je prisotno kronično vnetje prebavnega trakta. Diagnostika in spremljanje aktivnosti teh bolezni je zahtevno in dolgotrajno, saj se spremlja klinične simptome, biokemijske parametre vnetja v krvi, pregleda vzorec blata in opravi endoskopske ter histološke preiskave vnetega tkiva. Naš namen je bil ugotoviti, ali povišana koncentracija in aktivnost cirkulirajočih proteasomov korelira s stopnjo vnetja pri bolnikih. Osredotočili smo se na proteolitsko aktivne podenote β5c in β5i. Izbranim nehemoliziranim vzorcem plazme smo s tehniko ELISA določili koncentracijo podenot β5. Za aktivnost podenot smo določili kinetični profil z merjenjem fluorescence, pri čemer smo metodo predhodno optimizirali. Pridobljene rezultate smo korelirali z biokemijskimi označevalci vnetja. Prav tako smo preverili, ali nivo podenot oziroma njihova katalitična aktivnost korelirata z rezultati kliničnih točkovnikov HBI in MAYO, ki se uporabljata za oceno aktivnosti bolezni. Korelacije med izbranimi parametri v večini primerov nismo dokazali in tako ne moremo potrditi, da koncentracija ali aktivnost cirkulirajočih proteasomov odražata aktivnost bolezni. V bodoče so potrebne nadaljnje študije, predvsem na večjem številu vzorcev, da bi ugotovili, ali cirkulirajoči proteasomi sovpadajo z aktivnostjo kroničnih vnetnih črevesnih bolezni.20242024-12-13 08:45:03Magistrsko delo/naloga165909VisID: 114469sl