Določanje encimske aktivnosti lipaz v ekstraktih semen in kalčkov pri različnih vrednostih pH in temperatureJunkar, Tajda (Avtor) Poklar Ulrih, Nataša (Mentor) Skrt, Mihaela (Komentor) encimilipazesemenakalčkirastlinski ekstraktiencimska aktivnostNamen magistrskega dela je bil raziskati vpliv različnih temperaturnih in pH pogojev na aktivnost lipaz iz izbranih ekstraktov semen in kalčkov, ki so na voljo na slovenskem trgu. Zastavili smo si tri delovne hipoteze, in sicer, da je aktivnost lipaz odvisna od temperature, da bo najvišja pri nevtralnem pH, višja v ekstraktih semen kot v kalčkih ter se bo razlikovala glede na izvorni rastlinski vir. Analizirali smo semena in kalčke črne soje, gorčice, sončnice, pšenice, sladke koruze, oljne redkve ter semena fižola nežike,sezama in lanene kalčke. V vzorcih smo določili vsebnost vlage oz., delež suhe snovi, koncentracijo proteinov, katero smo določali spektrofotometrično ter izvedli gelsko NaDS elektroforezo. Ugotovili smo, da vsi vzorci vsebujejo proteine v velikosti od 10 do 72 kDa. Delež suhe snovi je večji v vzorcih semen, kot kalčkov, delež proteinov na suho snov pa je v večini vzorcev večji v kalčkih, kot v istovrstnih semenih. Največ proteinov smo določili v ekstraktu semen črne soje (31,7 mg/mL), najmanj pa v ekstraktu gorčičnih kalčkov (0,65 mg/mL). Aktivnost lipaz smo preračunali iz spektrofotometričnih meritev absorbance pri 400 nm, pri pH 7,2 in temperaturnih območjih 15 °C, 25 °C, 37 °C in 45 °C ter pri različnih pH območjih, in sicer pH 4,0, 6,5, 7,2 in 9,0 ter temperaturi 37 °C. Najvišjo aktivnost lipaz smo določili v ekstraktu gorčičnih in pšeničnih kalčkov (0,26 U/mL) pri 45 °C. Najnižjo aktivnost smo določili pri 15 °C v ekstraktu kalčkov sladke koruze (0,0019 U/mL). Aktivnost lipaz se z višjo temperaturo in višjim pH povečuje,iz česar lahko zaključimo, da imajo lipaze iz analiziranih vzorcev višjo aktivnost v bazičnem okolju, medtem ko je kislo okolje (pH 4,0) za lipaze iz izbranih vzorcev bilo najmanj ugodno, saj je bila aktivnost pod mejo detekcije.[T. Junkar]20242024-10-26 07:15:15Magistrsko delo/naloga164464UDK: 577.15:547.9VisID: 248446COBISS_ID: 213101827sl