Sinteza in biokemijsko vrednotenje 3-(1H-pirazol-1-il)benzonitrilnih zaviralcev butirilholin esteraze in z mitogenom aktivirane protein kinaze p38αLebar, Mihael (Avtor) Obreza, Aleš (Mentor) Ferjančič Benetik, Svit (Komentor) Alzheimerjeva bolezenbutirilholin esterazadvojni zaviralcinevrovnetjez mitogenom aktivirana protein kinaza p38αAlzheimerjeva bolezen je napredujoča nevrodegenerativna bolezen, ki se kaže s spremembami v centralnem živčnem sistemu. Ocenjeno je, da ima alzheimerjevo bolezen 40-50 milijonov ljudi po svetu, število pa naj bi se v naslednjih dvajsetih letih še podvojilo. Bolezen se kaže z izgubo spomina, oteženim govorom in težavami pri razmišljanju. Po najnovejših raziskavah naj bi pri pojavu in napredovanju alzheimerjeve bolezni imelo klučno vlogo nevrovnetje, ki ga lahko preprečimo s ciljanjem z mitogenom aktivirane protein kinaze 38α (p38α MAPK). Druga tarča je butirilholin esteraza (BChE), ki razgrajuje nevrotransmitor acetilholin, ki je pomemben za prenos signala med nevroni. Z zaviranjem BChE lahko ublažimo simptome alzheimerjeve bolezni. V magistrski nalogi smo načrtovali, sintetizirali in vrednotili tri potencialne dvojne zaviralce BChE in p38α MAPK,s fenil-1H-pirazolnim skeletom. Pri načrtovanju spojin smo za osnovo vzeli karbamatni derivat znanega zaviralca p38α MAPK - DP-802. Sečninsko skupino smo poskusili zamenjali s karbamatnima analogoma, pri čemer smo skušali sintetizirati različne aril-alkilkarbamate. Terc-butilno skupino smo poskusili zamenjati s trifluorometilno skupino. Acetamidno skupino na mestu 1 benzenovega obroča pa smo z namenom izboljšanja topnosti in olajšanja sinteznih korakov zamenjali za nitril. Sintetizirali smo tri končne spojine – 7a-c. Na podlagi rezidualne aktivnosti encimov v in vitro testih smo ugotovili, da so vse izkazovale zaviralno delovanje na BChE, pri tem sta 7a in 7b nanomolarna kovalentna zaviralca, medtem ko 7c deluje v mikromolarnem območju kot nekovalentni zaviralec. Za večjo selektivnost zaviranja BChE bi morali zamenjati terc-butilno skupino za večji aromatski fragment in tako bi zapolnili acil-vezavni žep. Naše spojine 7a-7c so zavirale tudi acetilholin esteraza v nanomolarnem območju. Pri testiranih mikro-/nanomolarnih koncentracijah spojine 7a-7c niso zavirale p38α MAPK. Najverjetnejši razlog za to je izguba treh vodikovih vezi z aminokislinskimi ostanki DFG žepa p38α MAPK pri zamenjavi sečnine iz spojine DP-802 za karbamat.20242024-10-25 08:45:16Magistrsko delo/naloga164439VisID: 111334sl