Optimizacija izolacije cirkulirajočih zunajceličnih veziklov in miRNA v plazmi bolnikov z depresijoMalečkar, Nika (Avtor) Videtič Paska, Alja (Mentor) izolacijazunajcelični veziklidepresijaultracentrifugiranjemiRNAqRT-PCZunajcelični vezikli so majhni membranski vezikli, ki jih izločajo celice in igrajo pomembno vlogo v medcelični komunikaciji. Delimo jih na majhne vezikle, mikrovezikle in apoptotske vezikle, odvisno od njihovega izvora in velikosti. Vsebujejo različne biomolekule, vključno z lipidi, proteini, RNA in DNA, kar jim omogoča pomembno vlogo pri prenosu signalov med celicami. Zunajcelični vezikli vplivajo na delovanje možganov in imunskega sistema ter sodelujejo pri patofiziologiji bolezni. So potencialni biooznačevalci za različna bolezenska stanja, vključno z rakom, nevrodegenerativnimi boleznimi in psihiatričnimi motnjami, med katere sodi tudi depresija. Z namenom standardizacije izolacije in karakterizacije veziklov smo s sledenjem minimalnih eksperimentalnih zahtev za opredelitev zunajceličnih veziklov in njihovih funkcij, poskušali najti najboljšo metodo izolacije za uporabo v kliničnem okolju. Glede na pridobljene rezultate sta se izolacija z ultracentrifugiranjem s saharozno blazinico in izolacija s komercialnim kompletom za izolacijo zunajceličnih veziklov z obarjanjem (Total Exosome Isolation Kit (from plasma) (Invitrogen$^{TM}$, Thermo Fisher Scientific, ZDA)) izkazali za primerljivi. Z obema metodama smo uspešno izolirali vezikle in izvedli vse analize za karakterizacijo in potrditev prisotnosti zunajceličnih veziklov ter določitev izražanja miRNA. Za uporabo v kliničnem okolju pa je najbolj primerna uporaba komercialnega kompleta za obarjanje, saj je hitra in enostavna metoda.20242024-10-15 13:30:00Magistrsko delo/naloga164006VisID: 22871COBISS_ID: 218004995sl