Ugotavljanje vsebnosti nizkomolekularnih nitrozaminov v zdravilih s tekočinsko kromatografijo, sklopljeno z masno spektrometrijo visoke ločljivostiSkube, Taja (Avtor) Roškar, Robert (Mentor) Planinšek Parfant, Timeja (Komentor) analizna metodaLC-HRMSekstrakcija na trdnem nosilcunizkomolekularni nitrozaminizdravilaNitrozamini so genotoksične nečistote prisotne vsepovsod okoli nas; v zraku, vodi, hrani, kozmetičnih izdelkih in nenazadnje tudi v zdravilih. Od leta 2018, s pojavom obsežnih odpoklicev z nitrozaminskimi nečistotami kontaminiranih zdravil, so nitrozamini postali ena izmed pomembnejših področij delovanja regulatornih organov. Kljub intenzivnemu raziskovanju na tem področju, še ni bilo razvite ustrezne analizne metode, s katero bi učinkovito sočasno vrednotili več nizkomolekularnih nitrozaminov v različnih izdelkih. Cilj magistrskega dela je bil tako razvoj občutljive, selektivne, natančne in robustne metode za sočasno vrednotenje trinajstih nizkomolekularnih nitrozaminov v različnih zdravilih iz različnih terapevtskih skupin. Metoda temelji na predpripravi vzorca z ekstrakcijo na trdnem nosilcu, kjer smo preučili več kartuš za ekstrakcijo in ugotovili, da je kartuša Strata X-C najbolj primerna. Nato smo postopek ekstrakcije optimizirali, kjer smo se osredotočili na izbor optimalne mase tabletne zmesi in volumna nanosa vzorca na kartušo ter na prilagajanje parametrov sušenja vzorca z namenom koncentriranja analitov. Predpripravi vzorca je sledila analiza s tekočinsko kromatografijo sklopljeno z masno spektrometrijo visoke ločljivosti. Metodo smo uspešno validirali v skladu z USP poglavjem o nitrozaminskih nečistotah, s katero smo potrdili njeno odlično linearnost, točnost ter ponovljivost. Dosežena meja določitve predstavlja določanje nitrozaminov v koncentraciji, ki znaša manj kot 45 % dovoljenega dnevnega vnosa za vse nitrozamine, kar potrjuje njeno občutljivost. Razvito analizno metodo smo uporabili za vrednotenje vsebnosti nitrozaminov v šestnajstih farmacevtskih izdelkih s vsebnostjo ene do treh zdravilnih učinkovin z različnimi fizikalno-kemijskimi lastnostmi. Ugotovili smo vsebnost N-nitrozodimetilamina (NDMA) v vzorcih dveh zdravil z vsebnostjo zdravilne učinkovine ranitidin, ki je za 43,2- oz. 58,8-krat presegala dovoljen dnevni vnos tega nitrozamina. To je bilo pričakovano, saj sta bila to vzorca s pretečenim rokom uporabnosti, znano pa je, da NDMA nastaja v reakciji nestabilnosti ranitidina, ki je lahko dodatno induciran s prisotnostjo nitrita v zdravilu, česar posledica je višanje vsebnosti NDMA skozi čas. Dodatno smo potrdili tudi robustnost metode na več vzorcih zdravil z vsebnostjo različnih zdravilnih učinkovin. S tem smo dokazali primernost metode za rutinsko kontrolo kakovosti farmacevtskih izdelkov, s čimer bi zmanjšali tveganje za zdravje ljudi.20242024-09-27 07:45:24Magistrsko delo/naloga162750VisID: 111061sl