Vpeljava spektrofotometrične analizne metode za določitev koncentracije proteinov v laboratorij kontrole kakovostiŠikovec, Tina (Avtor) Pajk, Stane (Mentor) Gartnar, Mana (Komentor) spektroskopijaSoloVPEkvalifikacijaprenos analizne metodeProizvodnja bioloških in podobnih bioloških zdravil, kjer je ključnega pomena njihova kakovost, varnost in učinkovitost, se je v zadnjem obdobju močno okrepila. Ker so takšna zdravila strukturno zelo kompleksna, moramo že med samo proizvodnjo spremljati nastajajoči produkt. Namen magistrske naloge je vpeljava spektrofotometrične analizne metode, ki za določanje koncentracije proteinov in drugih spojin uporablja variabilno optično pot. Ker smo se v laboratoriju s takšno določitvijo srečali prvič, smo se sprva lotili kvalifikacije sistema SoloVPE. Gre za sistem, ki meri absorbance pri različnih dolžinah poti s pomočjo katerih določi koncentracijo vzorca z uporabo enačbe, ki izhaja iz Beer-Lambertovega zakona. Pri namestitveni kvalifikaciji smo namestili Cary spektrofotometer in računalnik ter programsko opremo ViPER. Sledila je kvalifikacija delovanja, kjer smo izvedli poravnavo optičnega kabla, preverjanje spojnika in hitri preizkus za optimalno delovanje sistema. Preverjali smo, če sistem po namestitvi dosega ustrezno vrednost prenosa svetlobe. V naslednjem koraku kvalifikacije smo izvedli validacijski test, s katerim smo potrjevali pravilno namestitev in delovanje sistema SoloVPE. Validacijski test je obsegal test prenosa svetlobe, preizkus ponovljivosti dolžine poti ter preizkus linearnosti. Po uspešno potrjenih korakih kvalifikacije smo se lotili prenosa analizne metode. Prenesli smo jo iz laboratorija, kjer je le-ta že validirana. Preverjali smo, ali laboratorij kontrole kakovosti v Mengšu izpolnjuje ustrezne standarde delovanja za analizo medprocesnih vzorcev. Testne vzorce smo izbrali na podlagi matriksa in pričakovane koncentracije proteina ter reprezentativnosti za intermediate našega projekta. Rezultate smo vrednotili skladno s kriteriji sprejemljivosti za analizo in prenos analizne metode. Med izvajanjem analiz na SoloVPE smo bili pozorni tudi na razlike z izvedbo analiz s klasično UV-VIS metodo. Opazili smo številne slabosti klasične UV-VIS metode, kot na primer večja poraba časa za pripravo vzorcev, previdnost pri pripravi vzorcev, da le-tega količinsko ne zmanjka in zamudnost izvedbe analize enega vzorca. Glede na skladnost vseh rezultatov s kriteriji sprejemljivosti smo po zaključku kvalifikacije in prenosu metode potrdili, da smo udejanjili naš cilj. Laboratorij kontrole kakovosti v Mengšu smo kvalificirali za izvedbo analize z uporabo sistema SoloVPE. Analizna metoda je tako postala del že vzpostavljenih analitskih metod.20242024-09-15 07:45:18Magistrsko delo/naloga161868VisID: 108740sl