Vpliv vrste ionov na topnost globularnih proteinovTrajković, Miljan (Avtor) Hribar Lee, Barbara (Mentor) lizocimionitopnostdinamično sipanje svetlobeHofmeistrova vrstaV poznem 19. stoletju je Franz Hofmeister, profesor farmakologije na praški univerzi, skupaj s svojimi sodelavci, proučeval fiziološki vpliv različnih soli in njihovih koncentracij na proteine v raztopinah. Takrat je ugotovil, da se dodatek soli v raztopino proteina odraža ne le na njegovo topnost, pač pa tudi na druge fizikalno-kemijske lastnosti in stabilnost. Učinki so seveda odvisni od vrste in koncentracije soli oziroma ionov. Soli je razporedil v vrsto, glede na njihovo zmožnost, da stabilizirajo proteine v raztopini oziroma je ione soli razvrstil na podlagi njihovih liotropnih lastnosti, in sicer sposobnosti, da »vsoljevajo« (kaotropi) ali »izsoljevajo« (kozmotropi) proteine iz raztopine. Karakterističen predstavnik globularnih proteinov je lizocim. Lizocim deluje kot naravna nespecifična zaščita pred bakterijami in glivicami ter ima sposobnost razgradnje raznolikih polisaharidov celičnih sten. Najdemo ga v solzah, slini, jajčnem beljaku. Gre za protein s 129 aminokislinskimi ostanki. V diplomskem delu smo preučili vpliv različnih soli oziroma kozmotropnih in kaotropnih ionov na topnost globularnih proteinov, natančno na HEWL. Pripravili smo raztopine CaCl$_2$, Na$_2$CO$_3$, NaBr in NaF ter jih inkubirali s HEWL pri različnih koncentracijah soli. Potem smo z UV-Vis spektroskopijo spremljali napovedli koncentracijska območja posameznih soli, kjer pride do obarjanja HEWL. Z metodo dinamičnega sipanja svetlobe pa smo izmerili hidrodinamski radij nastalih delcev, transmitanco inkubirane raztopine in določili odvisnost prvega intenzitetnega vrha ter velikost številčno najpogostejšega klastra od koncentracije dodanih soli. Potrdili smo različen vpliv posameznih soli oz. ionov na obarjanje globularnega proteina, pri čemer so kozmotropni ioni zmanjšali topnost proteina in omogočili njegovo obarjanje, kaotropni pa so imeli obraten učinek.20242024-09-09 09:45:01Diplomsko delo/naloga161270VisID: 24172COBISS_ID: 213428227sl