Vloga astrocitov v dopaminski sinapsiSočan, Vesna (Avtor) Kržan, Mojca (Mentor) Debeljak, Maruša (Komentor) dopaminprivzem dopaminaastrocitipodganji astrocitinovorojena podganaodrasla podganaNETPMATOCTDATAstrociti so po obliki zvezdaste celice, ki so sestavni del glije ter so najštevilčnejše celice v osrednjem živčnem sistemu. So regulatorji številnih homeostatskih funkcij v osrednjem živčnem sistemu in imajo tudi ključno vlogo pri modulaciji sinaptičnega okolja ter vplivajo na aktivnost nevronov. Skupaj z nevronskimi celicami tvorijo tripartitno sinapso, koncept, ki opisuje dvosmerno komunikacijo med astrociti in nevroni. Plazemska membrana astrocitov izraža različne transporterje za privzem nevrotransmitorjev, hkrati pa tudi astrociti izločajo transmitorje, poimenovane gliotransmiterji. Regulacija dopaminskega signaliziranja v osrednjem živčnem sistemu ne vključuje zgolj nevronov, ampak tudi ne-nevronske celice kot so astrociti. Vloga astrocitov je v homeostazi in privzemu dopamina premalo raziskana. Razumevanje vloge astrocitov v homeostazi dopamina je ključno za razvoj potencialnih terapevtskih strategij za nevrološke motnje kot je npr. Parkinsonova bolezen. Cilj doktorske disertacije je bil preučiti vlogo astrocitov, pridobljenih iz novorojenih in odraslih podgan, pri privzemu dopamina. V okviru doktorske disertacije smo se osredotočili na farmakokinetične in molekularne značilnosti prenosa dopamina v dveh različnih možganskih regijah, striatumu in možganski skorji. Preučili smo tudi učinek dopaminergičnih zdravil, predvsem apomorfina in haloperidola, na izražanje transporterjev, vpletenih v privzem dopamina v astrocitih. Eksperimenti so bili izvedeni na primarnih kulturah astrocitov, vzgojenih iz striatuma in možganske skorje novorojenih in odraslih podgan. Farmakokinetične značilnosti privzema dopamina v astrocite so bile ovrednotene z uporabo radioaktivno označenega [3H]-dopamina. Kulture astrocitov so bile izpostavljene različnim pogojem, na podlagi česar smo ovrednotili časovno, temperaturno in koncentracijsko odvisnost privzema [3H]-dopamina v obeh proučevanih možganskih področjih. Prispevek posameznih transporterjev, vpletenih v privzem dopamina v astrocite, kot sta visokoafinitetna transporterja dopamina, dopaminski transporter in noradrenalinski transporter ter nizkoafinitetnih transporterjev, kot so organski kationski transporterji in plazemski membranski prenašalec monoaminov, je bil ovrednoten z različnimi inhibitorji monoaminov. Izražanje mRNK transporterjev je bilo ocenjeno z metodo kvantitativne verižne reakcije s polimerazo. Ocenili smo tudi učinke apomorfina, haloperidola in L-DOPA na izražanje transporterjev, vpletenih v privzem dopamina v astrocite s kvantitativno verižno reakcijo s polimerazo. Naši rezultati podpirajo hipotezi, da imajo astrociti aktivno vlogo pri odstranjevanju dopamina iz sinaptične špranje in da je privzem dopamina odvisen od različnih dejavnikov, kot so temperatura, čas inkubacije, koncentracija dopamina in področje možganov. Naši rezultati kažejo, da poteka privzem dopamina v astrocite tako z nizko- kot visokoafinitetnimi prenašalnimi sistemi, vendar verjetno ne vključuje DAT. Prav tako smo opazili pomembne spremembe v izražanju transporterjev dopamina v astrocitih ob izpostavljenosti dopaminergičnim substancam, zlasti apomorfinu. Rezultati te raziskave prispevajo k boljšemu razumevanju kompleksne regulacije signalizacije dopamina ter omogočajo vpogled v potencialne terapevtske cilje za nevrološke motnje.20242024-07-11 07:15:48Doktorsko delo/naloga159489VisID: 26382sl