Vpliv encimskega ekstrakta riževe semenske ovojnice na rast, razvoj in preživetje mezenhimskih matičnih celic, izoliranih iz maščobnega tkiva podganeŠkof, Maja (Avtor) Marc, Janja (Mentor) Cano Rodriquez, Maria Mercedes (Komentor) Ključne besede: mezenhimske matične celiceencimski ekstrakt riževe ovojniceproliferacijaoksidativni stres.Encimski ekstrakt riževe ovojnice (EERB) je produkt encimske hidrolize riževe ovojnice z endoproteazami. Je vodotopna zmes peptidov, polisaharidov in polinenasičenih maščobnih kislin, ki je bogata z antioksidanti (γ-orizanol, vitamin E). Mezenhimske matične celice, izoliranih iz maščobnega tkiva podgane (ADSC) so multipotentne matične celice, ki predstavljajo potencialen vir celic v regenerativni medicini. Njihova izolacija je relativno enostavna, prav tako imajo širok potencial za diferenciacijo, zato jih mnoge študije uporabljajo kot vir za regeneracijo različnih tkiv. V magistrski nalogi smo izvedli preliminarne študije, da bi ugotovili, kako EERB učinkuje na različne lastnosti ADSC. Zanimalo nas je, ali EERB kot dodatek mediju za gojenje celic vpliva na proliferacijo ADSC, diferenciacijo ADSC v nevrosfere in nevrone, ter ali EERB kot antioksidant pomaga zaščiti ADSC pred vplivom oksidativnega stresa. Pokazali smo, da je dodatek EERB celičnemu mediju učinkovito sredstvo za boljšo rast celic. S primerno koncentracijo v celičnem mediju EERB spodbuja rast ADSC, kar smo ugotovili s testom MTS in štetjem celic v Neubauerjevi celici. Pokazali smo tudi, da EERB vpliva na izražanje genov ADSC na primeru SOX2 in eEF. Ena izmed potencialnih uporab ADSC v regenerativni medicini je diferenciacija teh celic v nevrone. Proces diferenciacije je težaven in močno odvisen od okolja, kjer se celice nahajajo. Zaradi svojih antioksidativnih lastnosti bi EERB lahko vplival na bolj učinkovito diferenciacijo ADSC, čeprav je za dokončne zaključke potrebno še nekaj raziskav. Prav tako nas je zanimalo, ali EERB kot antioksidant varuje celice pred oksidativnim stresom. Z MTS testom in štetjem celic v Neubauerjevi komori smo pokazali, da je proliferacija celic v okolju z oksidativnim stresom bolj uspešna, če so celice pred tem izpostavljene EERB. Zanimivo je, da je LDH test citotoksičnosti pokazal, da je CH v kombinaciji s predhodno izpostavitvijo celic z EERB bolj toksičen kot če ekstrakta ne uporabimo. Tudi v tem primeru bi bilo potrebno narediti dodatne raziskave. Zaključimo lahko, da EERB ima potencial za nadaljnje raziskave in bi lahko vplival na bolj uspešno proliferacijo in diferenciacijo ADSC tudi v okoljih, kjer je prisoten oksidativni stres.20242024-03-02 07:45:06Magistrsko delo/naloga154795VisID: 104769sl