Vpliv z redoks stanjem posredovane signalizacije na redoks stanje v kloroplastih in nastanek stromulov pri preobčutljivostnem odgovoru krompirja na okužbo z virusomGolob, Nuša (Avtor) Lukan, Tjaša (Mentor) krompirjev virus Ypreobčutljivostni odgovorredoks stanjestromulivirusni klonKrompirjev virus Y (PVY) na okuženih listih rastlin krompirja kultivarja Rywal povzroči nastanek nekrotičnih območij, lezij, ki nastanejo kot posledica sprožitve s preobčutljivostnim odgovorom pogojene odpornosti. V magistrski nalogi smo po okužbi rastlin krompirja, ki izražajo na redoks stanje občutljiv zeleni fluorescenčni protein, s PVY spremljali nastanek stromulov ter spremembe kloroplastnega redoks stanja z uporabo konfokalnega mikroskopa in skripte za določanje redoks stanja. Primerjali smo rezultate pri genetsko spremenjenih rastlinah krompirja z znižano akumulacijo apoplastnih ROS (apoROS) ter kloroplastnih ROS (chlROS) in spremenjeno akumulacijo salicilne kisline (SA) v različnih kombinacijah. Ugotovili smo, da imajo omenjeni dejavniki časovno-prostorsko pogojen vpliv na kloroplastno redoks stanje ter nastanek stromulov, pri čemer se najbolj oksidirani kloroplasti z največ stromuli nahajajo bližje leziji. Pokazali smo, da na nastanek stromulov bistveno vplivata SA in chlROS, saj višja akumulacija SA nastanek inducira, nižja akumulacija SA in chlROS pa ga zavre. Da bi ocenili uporabnost in stabilnost na novo razvitega virusnega klona PVY-mTurquoise2, smo z njim okužili rastline tobaka (Nicotina clevelandii) ter zgoraj opisane genetsko spremenjene rastline krompirja. Potrdili smo, da je dinamika širjenja virusnega klona PVY-mTurquoise2 primerljiva PVY-GFP, ter da je stabilnost PVY-mTurquoise2 v rastlinah tobaka dolgoročna, saj virus ostaja stabilen po večih pasažah. Potrdili smo, da lahko v okuženih rastlinah krompirja s konfokalnim mikroskopom določimo s PVY-mTurquoise2 okužene celice ter na njihovem območju raziskujemo nastanek stromulov ter kloroplastno redoks stanje. V nalogi smo prikazali tudi učinkovit in optimiziran način spremljanja virusnih klonov PVY-GFP in PVY-mTurquoise2 z uporabo luminometra.[N. Golob]20242024-01-12 07:15:06Magistrsko delo/naloga153519UDK: 578.8:663.491(043.2)VisID: 236185COBISS_ID: 180871427sl