Meritve znotrajcelične signalizacije in presnove v podganjih astrocitih v kulturi po stimulaciji z agonisti receptorjev prostih maščobnih kislin GPR40 in GPR120Tivadar, Nika (Avtor) Vardjan, Nina (Mentor) Ca2+cAMPFRETglukozalaktatnanosenzorTAK-875TapsigarginTUG-891Astrociti so celice nevroglije v osrednjem živčnem sistemu, ki se nahajajo med kapilarami in nevroni. Preko glukoznih transporterjev iz krvi privzemajo glukozo, ki se v astrocitih skladišči v obliki glikogena in ob povečani možganski aktivnosti v procesu aerobne glikolize razgradi do laktata. Ta se transportira v nevrone preko laktatnih transporterjev, kjer se uporabi kot vir energije. Na površini astrocitov se izražajo z G-proteini sklopljeni receptorji (GPCR), ki ob aktivaciji sprožijo znotrajcelični Ca2+- in cAMP-signalni poti. Le-ti uravnavata glukozno presnovo v astrocitih. Receptorja GPR120/FFAR4 in GPR40/FFAR1 sta GPCR, ki ju aktivirajo dolgoverižne proste maščobne kisline. Njuna vloga v možganih je slabo raziskana. Zanimalo nas je, kako selektivna agonista GPR120/FFAR4, TUG-891 in GPR40/FFAR1, TAK-875, vplivata na znotrajcelično raven Ca2+ in cAMP ter na glukozno presnovo v astrocitih. S pomočjo Ca2+-indikatorja Fluo-4 AM in FRET-nanosenzorjev za cAMP, glukozo in laktat ter konfokalne mikroskopije v realnem času smo spremljali spremembe v znotrajcelični koncentraciji Ca2+, cAMP, glukoze in laktata v podganjih kortikalnih astrocitih v kulturi po draženju s selektivnima agonistoma TUG-891 ali TAK-875. Draženje astrocitov z 10 μM TUG-891 ni povzročilo sprememb v znotrajcelični koncentraciji Ca2+, a je sprožilo porast v koncentraciji cAMP in laktata, kar nakazuje, na sklopitev GPR120/FFAR4 z Gs-proteinom ter aktivacijo cAMP-signalne poti in aerobne glikolize. Draženje z 10 μM TUG-891 ali TAK-875 ni vplivalo na znotrajcelično raven proste glukoze. Sklepamo, da agonista ne vplivata na privzem glukoze iz zunajceličnine, ki je odvisen od znotrajcelične koncentracije Ca2+, na katero agonista ne vplivata.[N. Tivadar]20232023-11-30 07:15:37Magistrsko delo/naloga152591UDK: 577.2(043.2)VisID: 235578COBISS_ID: 174465795sl