Ugotavljanje odpornosti, tolerance in občutljivosti različnih kultivarjev hmelja (Humulus lupulus) na viroide HLVd, HSVd in CBCVdLap, Patricija (Avtor) Jakše, Jernej (Mentor) Volk, Helena (Komentor) hmeljtkivne kultureviroidi CBCVdHLVdHSVdinokulacijaRT-PCRSlovenske nasade hmelja ogrožajo trije različni viroidi: hmeljni latentni viroid (HLVd, angl. hop latent viroid), viroid zakrnelosti hmelja (HSVd, angl. hop stunt viroid) in viroid razpokanosti skorje agrumov (CBCVd, angl. citrus bark cracking viroid). Namen te magistrske naloge je bil pregledati večje število kultivarjev (v nadaljevanju bomo uporabljali besedo sorta) hmelja na občutljivost za okužbo z viroidi (HLVd, HSVd in CBCVd), ki ogrožajo slovenska hmeljišča. Tekom poskusa smo gojili različne sorte hmelja v in vitro razmerah: pripravili smo gojišče, subkultivirali rastline na sveža gojišča, spremljali rast rastlin. Pripravili smo transkripte viroidov, izvedli validacijo uspešnosti postopka in ustreznosti transkriptov z napravo Agilent Bioanalyser 2100 in nato rastline hmelja v tkivnih kulturah inokulirali z viroidnimi transkripti in dokumentirali rast ter razvoj inokuliranih in neinokuliranih rastlin. Po osmih tednih je sledilo potrjevanje uspešnosti inokulacije hmelja z metodo RT-PCR in gelsko elektroforezo. Naši podatki so pokazali, da smo z našo novo uveljavljeno metodo inokulacije viroidov uspešno okužili vse sorte hmelja z uporabo transkriptov viroidov. Zanimivo je, da je bila stopnja okužbe najvišja pri transkriptih HSVd (100 % za vseh 13 sort), sledi CBCVd (100 % za 9 sort in 75 % za 4 sorte) in najnižja za HLVd (75 % za 3 sorte, 50 % za 5 sort in 25 % za 3 sorte). Doslej nismo opazili razlik v rasti in razvoju inokuliranih in neinokuliranih rastlin in pri testiranih sortah nismo odkrili morebitne odpornosti ali tolerance. Rastline sorte 'Wye Target' in 'Bobek' so bile okužene s HLVd že pred začetkom našega dela in tako v tem primeru ni šlo za rastline brez virusov in viroidov.20232023-10-21 07:16:29Magistrsko delo/naloga151823VisID: 232567COBISS_ID: 169499651sl