Ekstrakcija zdravilne učinkovine kordicepin iz glive Cordyceps militaris in njegovo določevanje z uporabo visokoločljivostne tekočinske kromatografijeZotler, Mateja (Avtor) Marolt, Gregor (Mentor) kordicepinekstrakcijaCordyceps militarisoptimizacija procesaHPLCCordyceps militaris je zdravilna gliva, zelo cenjena v tradicionalni azijski medicini. Njena glavna bioaktivna spojina je kordicepin. Cilj diplomske naloge je bil optimizacija ekstrakcije kordicepina iz posušene in zmlete glive C. militaris. Za spremljanje učinkovitosti ekstrakcije sem delno validirala HPLC analizno metodo za določevanje vsebnosti kordicepina v ekstraktih. Uporabljena analizna metoda se je izkazala za ponovljivo in linearno v delovnem območju. Optimizacije sem se lotila enofaktorsko. Vsak parameter sem optimizirala v samostojni seriji poskusov. Parameter, ki sem ga želela optimizirati, sem pri vsaki ekstrakciji znotraj serije spremenila, medtem ko so bili ostali parametri konstantni. Optimizirano vrednost parametra sem nato uporabila pri nadaljnjih serijah. Uspešnost ekstrakcije sem ovrednotila glede na razmerje med čim večjim deležem ekstrahiranega kordicepina in čim manjšim deležem nečistoč v suhi masi ekstrakta. V diplomskem delu sem izvedla pet večjih skupin poskusov, v katerih sem preučevala: (i) vpliv deleža etanola v topilu na učinkovitost ekstrakcije, (ii) vpliv različnih razmerij med volumnom topila in maso suhega vzorca na učinkovitost ekstrakcije, (iii) izluževanje kordicepina iz vzorca, ki mu je bil zaporedno odstranjen ekstrakt in dodano sveže topilo, (iv) vpliv pH zmesi vzorca in topila na učinkovitost ekstrakcije, ter (v) perkolacije pri različnih temperaturah, pri čemer sem spremljala časovno odvisnost koncentracije kordicepina v eluentu. Najprej sem izvedla optimizacijo ekstrakcije v šaržni obliki. Za najprimernejše topilo se je izkazal 76,8 % (V/V) etanol, za najprimernejše razmerje med volumnom topila in maso glivnega vzorca pa 20 mL/g. Izkazalo se je, da pH ekstrakcijske zmesi topila in glivnega vzorca ne vpliva na končno učinkovitost ekstrakcije. V delno šaržni obliki sem izvedla tudi imitacijo industrijske ekstrakcije, pri kateri bi v reaktorju macerirali topilo in posušen C. militaris, nato pa bi odlili ekstrakt nad usedlino in dodali sveže topilo. Ob vsakem naslednjem dodatku topila se koncentracija v ekstraktu zmanjša za približno en velikostni razred. Za najučinkovitejšo se je izkazala perkolacija pri 60 °C.20232023-09-07 13:35:00Diplomsko delo/naloga149597VisID: 22149COBISS_ID: 169953283sl