Vzpostavitev in molekularna opredelitev celične linije mišjega oralnega ploščatoceličnega karcinoma MOC1 s stabilnim izražanjem onkoproteinov E6 in E7Mele, Nina (Avtor) Čemažar, Maja (Mentor) Jesenko, Tanja (Komentor) ploščatocelični karcinom glave in vratuhumani papiloma virusMOC1E6E7pRBp53radioterapijaARDretrovirusna transdukcijaPloščatocelični karcinomi glave in vratu (PCKGV) so pogosta rakava obolenja z visoko umrljivostjo, ki jih lahko povzroči tudi humani papiloma virus (HPV). Okužbe s HPV lahko pri PCKGV razdelimo na produktivno in neproduktivno okužbo. Pri neproduktivni okužbi pride do vključitve virusnega genoma v gostiteljski genom, kar zaradi nenadzorovanega izražanja onkoproteinov E6 in E7 pripelje do maligne transformacije celic. Proteina E6 in E7 vplivata na protein 53 (p53) in protein retinoblastoma (pRB), ki sta odgovorna za uravnavanje celičnega cikla ter sprožitev apoptoze. V nalogi smo pripravili dve HPV-pozitivni celični liniji mišjega PCKGV MOC1 z virusno transdukcijo genov za proteina E6 in E7 ter določili uspešnost priprave celične linije glede na izražanje onkoproteinov E6 in E7 na nivoju mRNA in proteinov. Iz celičnih linij smo izolirali RNA, ki smo ji določili koncentracijo in čistost, nato pa smo jo uporabili za analizo relativnega izražanja genov za onkoproteina E6 in E7 glede na hišna gena za beta-aktin in gliceraldehid 3-fosfat dehidrogenazo (GAPDH). Pripravili smo tudi celične preparate, ki smo jih imunofluorescenčno pobarvali s protitelesi proti onkoproteinoma E6 in E7 ter tako preverili izražanje omenjenih onkoproteinov na ravni proteinov. Dokazali smo, da je izražanje stabilno na obeh nivojih.20232023-04-01 07:15:21Magistrsko delo/naloga145057VisID: 217609COBISS_ID: 147559427sl