Vpliv bioaktivnega peptida PSK-α na regeneracijo protoplastov vrste Brassica oleraceaVogrinčič, Valentin (Avtor) Murovec, Jana (Mentor) biotehologijaprotoplastipeptid PSKcvetačagenetska transformacijaProtoplasti se kljub kompleksnosti njihovega gojenja in regeneracije še vedno veliko uporabljajo pri raziskavah rastlinskega razvoja, fiziologije in molekularne biologije, pridobivanju somatskih hibridov in cibridov, genski transformaciji in preurejanju genomov. Za zadnje tri uporabe je potrebna visoka frekvenca celičnih delitev in uspešna regeneracija rastlin. Da bi to dosegli pri štirih sortah vrste Brassica oleracea, smo v prvem delu poskusa preizkusili dva različna protokola gojenja protoplastov, v drugem vpliv mitogenega peptida PSK-α na regeneracijo protoplastov in končno vpliv PSK-α ali hranilne suspenzije netretiranih protoplastov na regeneracijo transformiranih protoplastov. Gojili smo mezofilne protoplaste dveh sort cvetače in dveh sort rdečega zelja imobilizirane v alginatnem matriksu pri nekoliko nižjih gostotah kot se običajno gojijo protoplasti te vrste. V nizkih gostotah živih celic se gojijo tudi protoplasti po transformaciji, ko selekcijski pritisk zmanjša število živih in delitve sposobnih celic. Prvi protokol z različnimi sestavami gojišč se je izkazal za učinkovitega pri regeneraciji mikrokalusa vseh štirih sort, drug protokol, po katerem je bila sestava tekočega gojišča stalna, pa samo ene sorte. V drugem delu raziskav je PSK-α povečal stopnjo regeneracije mikrokalusa samo pri obeh sortah cvetače. Končno PSK-α v primerjavi s hranilno suspenzijo ni imel tako izrazitega vpliva na regeneracijo transformiranega mikrokalusa, kar je skupaj z najmanjšim vplivom PSK-α pri najnižji uporabljeni gostoti protoplastov nakazovalo na nezadostno raven dodanega PSK-α in/ali ključno vlogo še neznanih rastnih faktorjev poleg PSK-α.20222022-09-22 07:17:34Magistrsko delo/naloga140956VisID: 211815COBISS_ID: 125889795sl