Uporaba vrstične elektronske mikroskopije za ugotavljanje morfoloških razlik med apoptozo in feroptozo pri humanih endotelijskih celicahKupčič, Saša (Avtor) Drobne, Damjana (Mentor) vrstična elektronska mikroskopijaapoptozaferoptozamorfologijaHUVECstaurosporinRSL3SPIONcitotoksičnostresazurinAChEpretočna citometrijalipidna peroksidacijaPreverjali smo, ali so morfološke spremembe pri apoptozi in feroptozi, vidne z vrstičnim elektronskim mikroskopom, dovolj značilne in jasne, da lahko zgolj na podlagi le-teh opredelimo tip smrti opazovane celice. Prav tako želimo ugotoviti, ali superparamagnetni železovi oksidni nanodelci (SPIONi) povzročijo celično smrt, ki ima molekularne in morfološke lastnosti, ki definirajo feroptozo. Celice HUVEC smo izpostavljali staurosporinu, ki je induktor apoptoze, RSL3, ki je induktor feroptoze ter SPIONom. Izvedli smo test citotoksičnosti, merili pa smo tudi vpliv staurosporina, RSL3 in SPIONov na specifično aktivnost acetilholinesteraze (AChE), stopnjo lipidne peroksidacije ter stopnjo apoptoze. Morfološke spremembe površine izpostavljenih celic smo opisali z vrstično elektronsko mikroskopijo. AChE se ni izkazala kot uporaben biomarker za ovrednotenje celične smrti, stopnja lipidne peroksidacije kot biomarker feroptoze pa je bila povišana pri tretiranju s RSL3 in SPIONi. Test stopnje apoptoze se je izkazal kot premalo specifičen, saj ni omogočal razločevanja med različnimi vrstami celične smrti. Staurosporin je na površini celic povzročil morfološke spremembe značilne za apoptozo, na celicah, izpostavljenih RSL3 so bile opazne morfološke značilnosti, ki jih literatura ne opisuje kot značilne za feroptozo. Tudi celice, izpostavljene SPIONom, niso imele za apoptozo in feroptozo-značilnih morfoloških značilnosti. Predvidevali smo, da SPIONi aktivirajo kombinacijo različnih mehanizmov celičnih smrti.[S. Kupčič]20222022-09-15 08:00:19Magistrsko delo/naloga140477UDK: 615.9VisID: 210683COBISS_ID: 122142979sl