Vloga antioksidantov pri dolgoročnem shranjevanju celičnih linijPagon, Lara (Avtor) Narat, Mojca (Mentor) Korencic , Anja (Komentor) celične bankedolgoročno shranjevanjecelične linijesesalske celiceCHOkrioprotektantiantioksidantiCelična banka predstavlja homogeno zamrznjene celice v obliki alikvotov, ki se uporabljajo kot vstopni material za proizvodnjo rekombinantnih terapevtskih učinkovin (proteinov) v biofarmacevtski industriji. Zato je pomembno, da je proces proizvodnje celičnih bank optimiran, robusten in ponovljiv ter da so celice ves čas v eksponentni fazi rasti. Zamrzovanje predstavlja kritičen korak v proizvodnji celičnih bank, saj celice med tem doživljajo temperaturni, oksidativni in osmotski šok, ki lahko povzroči fiziološke in mehanske spremembe. To lahko negativno učinkuje na njihovo rast in posledično na sposobnost proizvodnje rekombinantnih terapevtskih učinkovin. Z namenom izboljšanja rasti in viabilnosti celic smo uporabili štiri različne antioksidante, ki smo jih uporabili na modelu načrtno oslabljene celične banke z znižano celično viabilnostjo in koncentracijo. Preverjali smo učinek vrste in koncentracije dodanega antioksidanta ter časovno točko dodanega antioksidanta. Optimalen test za preverjanje učinkovanja antioksidantov na slabo banko je takšen, da antioksidante dodajamo ob precepitvi v zadnjo pasažo ter uporabljamo 15-minutno izpostavitev DMSO pred zamrzovanjem. Vse skupaj smo testirali na celični liniji CHO-X, nato pa pripravo slabe banke ter učinek koncentracije askorbinske kisline testirali tudi na celični liniji CHO-Y. Ugotovili smo, da z uporabo 5 mM askorbinske kisline (A2) lahko učinkujemo na zvišanje viabilnosti slabe banke za 20–30 % in koncentracije (nad 1,0 × 106 živih celic/mL).20222022-09-15 07:17:41Magistrsko delo/naloga140446VisID: 210680COBISS_ID: 125659907sl