Superločljivostna mikroskopija kanalov akvaporina 4, Kir4.1 in ORF3a v plazemski membrani podganjih astrocitovRupnik, Marko (Avtor) Jorgačevski, Jernej (Mentor) AQP4Kir4.1ORF3aSARS-CoV-2celična kulturapodganji astrocitivisokoločljivostna mikroskopijaSIMkolokalizacijaDelovanje astrocitov je ključnega pomena za uravnavanje vodne in ionske homeostaze v centralnega živčnega sistema (CŽS). V astrocitih igrajo pri teh procesih vodilno vlogo kalijevi kanalčki iz družine Kir (Kir4.1) in akvaporini tipa 4 (AQP4). Domneva se, da se kanala v plazemski membrani astrocitov izražata na podobnih mestih, zaradi česa se sklepa na njuno povezano funkcijo. Pri okužbah z nevtrotropnimi virusi kot so SARS-CoV-2 lahko pride do kliničnih znakov in simptomov, ki so posledica motenega delovanja CŽS. Mednje spadajo npr. ageusia, anosmia, težave s koncentracijo in utrujenost med in po prebolevanju COVID-19. Eden možnih krivcev za neravnovesje v CŽS ob okužbi je verjetno protein ORF3a, ki ga kodira genom SARS-CoV-2. Protein ORF3a je viroporin, ki lahko opravlja funkcijo ionskega kanala, poleg tega bi naj v celicah motil tudi zlivanje avtofagosomov z lizosomi. V raziskavi smo s pomočjo visokoločljivostne metode fluorescenčne mikroskopije (mikroskopija s strukturirano osvetlitvijo – SIM) preučili lokalizacijo Kir4.1 in AQP4 v celični kulturi podganjih astrocitov. V nadaljevanju smo raziskali še vpliv virusnega proteina ORF3a na izražanje AQP4 in Kir4.1. Pokazali smo, da se signala AQP4 in Kir4.1 ne prekrivata, kljub temu se v astrocitih izražata v neposredni bližini. Prav tako smo pokazali, da izražanje ORF3a v celični kulturi podganjih astrocitov vpliva na gostoto izražanja AQP4, čeprav se ORF3a in AQP4 v astrocitih prostorsko izražata povsem ločeno.[M. Rupnik]20222022-09-15 07:16:59Magistrsko delo/naloga140438UDK: 576VisID: 210672COBISS_ID: 122106883sl