Poskus sinteze manjšega proteina z uporabo metode na trdnem nosilcuRenko, Aljaž (Avtor) Gazvoda, Martin (Mentor) Fmoc zaščitaaminokislinepeptidikontinuirni pretokSPPSSPPS (angl. Solid-Phase Peptide Synthesis, slo. sinteza peptida na trdnem nosilcu) je dokaj enostavna in zanesljiva metoda za sintezo peptidov in manjših proteinov. Ti v naravi predstavljajo zelo pomembne molekule, saj opravljajo mnogo življenjsko pomembnih funkcij. Pri SPPS največkrat uporabljamo Fmoc skupino, kot začasno zaščito na N-koncu modificirane aminokisline. Zaščititi moramo tudi vse ostale funkcionalne skupine aminokislin, ki bi lahko reagirale tekom sinteze, tako da gradimo le eno glavno polipeptidno verigo. Pripravili smo dva peptida – enega manjšega, tako s šaržno sintezo na koloni, s kontinuirnim pretokom in brez trajnih zaščitnih skupin. Po uspešni pripravi krajšega peptida (12 aminokislin) smo se lotili sinteze nekoliko daljšega peptida (26 aminokislin). Po protokolu smo najprej na nosilec vezali prvo modificirano aminokislino, spirali z DMF, odstranili Fmoc skupino s piperidinom v DMF ter zopet spirali. Te cikle smo ponavljali, dokler nismo v verigo vključili vseh predvidenih aminokislin. Peptid smo gradili od C- proti N-koncu. Peptide smo nato očistili na reverzno fazni kromatografski koloni, ter jih analizirali s HPLC in HRMS. 20222022-09-06 13:15:06Diplomsko delo/naloga139718VisID: 21623COBISS_ID: 126597635sl