Izolacija protoplastov iz listov različnih genotipov hmelja (Humulus lupulus L.)Kunc, Petra (Avtor) Štajner, Nataša (Mentor) Stajič, Ester (Komentor) hmeljverticilijska uvelost hmeljahuda viroidna zakrnelost hmeljaprotoplastigenska transformacijaHmelj (Humulus lupulus L.) je dvodomna zeljnata trajnica in ovijalka. Pridelovanje hmelja je danes razširjeno predvsem zaradi uporabe v pivovarski industriji. Hmelj je gostiteljska rastlina številnih škodljivih organizmov, vse pogosteje se pri pridelavi hmelja srečujemo z gospodarsko pomembnima boleznima, verticilijsko uvelostjo hmelja ter hudo viroidno zakrnelostjo hmelja. Žlahtniteljski cilji se osredotočajo na selekcijo in vzgojo tolerantnih genotipov na omenjeni bolezni. Za žlahtnjenje rastlin se vse bolj uporabljajo sodobnejši pristopi rastlinske biotehnologije. Za ta namen smo razvili protokol za izolacijo protoplastov iz listov hmelja. Protoplasti so rastlinske celice brez celične stene, pri katerih je vsebina celice obdana le s celično membrano. Pogosto jih uporabljamo za genske transformacije. V našem delu smo ugotovili, da je za rast hmelja v tkivni kulturi najprimernejše MS gojišče z vitamini in glukozo, brez dodatka hormonov. Največji izplen protoplastov smo dobili z enourno plazmolizo v 0,4 M manitolu in prekonočno inkubacijo 0,4 g rastlinskega tkiva v 8 ml encimske raztopine ER3 z 2,0 % koncentracijo celulaze Onozuka R-10 in 0,5 % koncentracijo macerocima R-10. Protoplaste smo izolirali iz listov različnih genotipov hmelja. Uporabili smo liste rastlin hmelja, gojenih v in vitro razmerah in v rastlinjaku ter divji hmelj, ki je uspeval na prostem. Najboljše rezultate smo dobili pri in vitro vzgojenih rastlin genotipa 'Celeia', kjer je bila živost 85,6 %. Divji hmelj, rastlinski material iz rastlinjaka ter in vitro vzgojene rastline genotipa 'Styrian Eureka' so se izkazali kot neprimeren rastlinski material za izolacijo protoplastov z uporabljenim postopkom.20222022-09-03 07:17:02Magistrsko delo/naloga139490VisID: 208457COBISS_ID: 119919107sl