Vpliv proteina gp1 na aktivnost promotorjev P1 in P2 bakteriofaga GIL01Popović, Maja (Avtor) Butala, Matej (Mentor) protein gp1temperatni bakteriofag GIL01Bacillus thuringiensispromotor P1 in P2lizogeni in litični življenjski cikelodziv SOSBakteriofag GIL01 je temperatni tektivirus katerega gostitelj je bakterija Bacillus thuringiensis serovar israelensis. Fag GIL01 ob vstopu v celico lahko vzpostavi lizogenijo znotraj katere lahko ostane vse dokler ne pride do večjih poškodb DNA. Te sprožijo bakterijski odziv SOS. Za regulacijo lizogenije in izražanja genov bakteriofag GIL01 namreč izrablja bakterijski trankripcijski faktor LexA in fagni protein gp7. Ob sprožitvi odziva SOS pride do cepitve proteina LexA in s tem njegove inaktivacije. Inaktivacija LexA sproži litični cikel faga GIL01. Z beta-galaktozidaznimi testi in površinsko plazmonsko resonanco smo dokazali, da poleg LexA tudi protein gp1 faga GIL01 uravnava izražanje genov za replikacijo in regulacijo, ki so pod kontrolo promotorjev P1 in P2 faga GIL01. Protein gp1 tako sodeluje pri vzpostavitvi in ohranjanju lizogenije faga GIL01. Gre za prvi dokaz, da ima fag GIL01 tudi lasten represor za regulacijo promotorjev P1 in P2, ki je deloma neodvisen od gostiteljevega odziva SOS. S površinsko plazmonsko resonanco smo dokazali, da se predvidoma 5 do 6 monomerov proteina gp1 stabilno in z visoko afiniteto veže na promotor P2. Monomeri proteina gp1 najverjetneje tvorijo filament, ki sterično ovira vezavo RNA polimeraze in tako zniža aktivnost promotorja P2. Z beta-galaktozidaznimi testi smo ponovno potrdili, da je za uravnavanje izražanja genov za vzpostavitev lizogenije pri fagu GIL01 nujno potrebna prisotnost korepresorja gp7. Iz rezultatov je razvidno tudi, da promotorja P1 in P2 vplivata na aktivnost drug drugega.[M. Popović]20222022-07-10 07:15:19Magistrsko delo/naloga138094UDK: 577VisID: 204703COBISS_ID: 114958339sl